转AtCBF3基因苹果株系对盐碱及重金属胁迫的响应

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转录因子CBF与植物体抗低温、干旱和盐碱等非生物胁迫能力有关,其基因转化为植物抗逆基因工程育种提供了新的途径,也为解决苹果生产中逆境伤害的问题提供了新的方向。本试验以继代保存8年的转AtCBF3基因苹果嘎拉组培试管苗为试材,通过抗卡那霉素筛选和PCR检测,研究了外源基因在转基因苹果植株的遗传稳定性;通过不同浓度NaCl、CuSO4的胁迫处理,研究了转基因苹果株系的外部形态特征和生理生化特性与抗逆性的关系;通过温室移栽试验,研究了温室环境对转基因苹果株系生长状况的影响以及外源激素对转基因株系的作用。主要研究结果如下:1对继代培养8年的转AtCBF3基因苹果嘎拉2个株系组培苗进行了卡那霉素抗性筛选和PCR检测,结果表明外源nptⅡ和AtCBF3基因在长期继代保存苹果组培苗的分化增殖过程中没有丢失。2在4g/L NaCl胁迫处理、相同胁迫时间下转基因苹果株系受害指数显著低于非转基因株系,同时转基因株系受害症状出现晚于非转基因株系,表明外源AtCBF3基因的导入在一定程度上可提高苹果组培苗的耐盐性。3在4g/L NaCl胁迫处理下,相同胁迫时间内转基因苹果株系试管苗相对电导率显著低于非转基因株系,表明外源AtCBF3基因的导入对维持苹果组培苗细胞膜的稳定性起到了一定的作用。4在5mg/L铜处理下,转基因株系的生根率显著高于非转基因株系;在10mg/L铜处理下,转基因苹果组培苗的愈伤组织发生率显著高于非转基因株系。表明外源AtCBF3基因的导入在一定程度上可提高苹果组培苗对铜的耐性。5在50mg/L以上浓度铜胁迫下,转基因苹果株系的相对电导率显著低于非转基因株系。表明铜离子胁迫下外源AtCBF3基因的导入对苹果株系细胞膜起到了保护作用。6在温室中生长的转基因苹果植株在冬季来临前出现叶片衰老、植株矮化、生长停止现象。表明外源AtCBF3基因的导入对转基因苹果嘎拉植株的生长发育具有调节作用。7对生长受到抑制的转基因苹果株系喷施2mg/mL外源赤霉素GA3,可以促进转AtCBF3基因苹果植株的再次生长。
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