茶叶籽油与油茶籽油不皂化物研究

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从茶叶籽中提取到的油脂叫茶叶籽油。茶叶籽油中的不饱和脂肪酸含量高达82%[1],还富含茶多酚、植物甾醇、角鲨烯以及维生素E等活性成分。《中华人民共和国卫生部2009年第18号公告》中批准茶叶籽油为新资源食品[2]。从油茶籽中提取到的油脂叫油茶籽油。茶油[3]的脂肪酸含量、比例与橄榄油相似,是能够与橄榄油相媲美的高档健康食用油。《中国食物结构改革与发展规划纲要》对山茶油大力提倡推广。不皂化物是指油脂中不与NaOH起皂化反应的物质。本论文重点研究茶叶籽油与油茶籽油不皂化物,通过实验测定茶叶籽油与油茶籽油不皂化物的组成成分,探索分离提纯的方法,并对茶叶籽油中角鲨烯进行定量分析,为茶叶籽油与油茶籽油的生产开发与有效利用提供实验依据。论文主要研究结果如下:1、确定茶叶籽油与油茶籽油不皂化物的含量。依据国标GB/T 5535.2—2008/ISO来提取不皂化物并测定含量,测得茶叶籽油毛油中不皂化物含量为5.63%,油茶籽油毛油中不皂化物含量为5.56%。通过微波辅助浸提法提取茶叶籽油与油茶籽油,所提取的茶叶籽油中不皂化物含量为7.51%±0.51%,油茶籽油为7.36%±0.37%。2、确定茶叶籽油与油茶籽油不皂化物的组成成分。采用GC-MS分析茶叶籽油与油茶籽油不皂化物成分。结果表明:通过GC-MS从茶叶籽油不皂化物中分离出77个峰,鉴定出20种物质,其中羊毛甾醇含量最高,为5.91%,还有α-生育酚、茉莉酮、角鲨烯等物质;通过GC-MS从油茶籽油不皂化物中分离出56个峰,鉴定出13种物质,其中角鲨烯含量最高,为2.69%,还有香叶基芳樟醇、生育酚、麦角甾醇物质。通过磷硫铁法测定茶叶籽油与油茶籽油中总植物甾醇的含量,得出茶叶籽油中总植物甾醇含量为2.07±0.001 g/kg,油茶籽油中总植物甾醇含量为3.565±0.002 mg/kg。3、茶叶籽油与油茶籽油不皂化物的分离与提纯。以石油醚与乙醚为展开剂,体积比为9:1,对不皂化物进行初步薄层分离,得到六条色带。以紫外光谱显示初步分离的结果,测定各组分在紫外区200~350 nm之间的光谱扫描曲线。结果显示:茶叶籽油不皂化物通过薄层分离出来的六条带在200~350 nm间波形不同,且最大吸收峰不同,最大吸收峰波长依次为:237、242、240、233、238 nm和232 nm;油茶籽油不皂化物通过薄层分离出来的六条带在200~350 nm间波形不同,且最大吸收峰不同。最大吸收峰波长依次为:236、241、240、234、238 nm和232 nm。通过薄层层析,达到初步分离茶叶籽油与油茶籽油不皂化物组分的要求。采用柱层析法提纯茶叶籽油及油茶籽油不皂化物。结果表明:茶叶籽油不皂化物中烃类、三萜醇类、4-甲基甾醇类及甾醇类的含量分别为15.75%、54.9%、1.5%及12%,油茶籽油不皂化物中烃类、三萜醇类、4-甲基甾醇类及甾醇类的含量分别为21%、58.15%、0.55%及11%。其中油茶籽油不皂化物中烃类和三萜醇类的含量要高于茶叶籽油,而茶叶籽油不皂化物中4-甲基甾醇类和甾醇类的含量要高于油茶籽油。4、确定茶叶籽油中角鲨烯的含量。采用高效液相色谱法对茶叶籽油中的角鲨烯进行定量分析。通过C18柱分离茶叶籽油样品中的角鲨烯,采用外标法计算角鲨烯的准确含量。结果表明:以甲醇/乙腈(60+40,v/v)为流动相、检测波长210 nm、流速2 mL/min、柱温30℃时,能有效分离茶叶籽油样品中的各组分,再经HPLC测得茶叶籽油中角鲨烯含量为4.1 mg/kg。当角鲨烯质量浓度在20~500 mg/L之间时,峰面积和质量浓度的线性关系较好,线性相关系数(R2)为0.9990;平均加标回收率为84.2%~90.1%,相对标准偏差(RSD)小于6.98%(n=4),此方法的测定低限(LOQ)为2.7 mg/kg。
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