长角血蜱胚胎发育的研究

来源 :河北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaixin0322
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蜱类为专性吸血的外寄生动物,不仅传播多种病原体而且还有很强的繁殖力。每只雌蜱一生能产卵几百至几千粒,蜱类的繁殖力决定了其种群数量及危害程度。所以了解蜱卵胚胎发育的规律对预测其幼虫出现的时期,掌握防治时机有重要的实践意义。本文以广泛分布于我国的长角血蜱Haemaphysalis longicornis Neumann为研究对象,运用组织学、激光共聚焦技术、SDS-PAGE、生物化学、免疫印迹、气相色谱/质谱(GC/MS)等现代生物学的研究方法,首次对其胚胎发育过程中的形态和物质变化进行了较系统的研究,揭示了蜱类胚胎发育的规律。主要结果如下:1、建立了适合长角血蜱卵的石蜡切片技术体系:以10%次氯酸钠溶液软化卵壳3~5 min,用Smith液固定24h,用系列乙醇脱水,二甲苯透明,得出了最佳脱水和透明条件。2、获得了较为系统的胚胎发育不同时期的实体照片,这些时期包括胚盘形成、胚带形成、器官形成等发育时期。3、SDS-PAGE结果显示:胚胎发育中,156KD、150KD、120KD、107KD、68KD、17KD、18KD、20KD、21KD和22KD蛋白的动态变化均出现在长角血蜱形态发生的不同时期。4、卵黄蛋白(Vn)的Western-blot分析结果显示:Vn的八个亚基在胚胎发育中有不同程度的消耗,幼虫非寄生期的营养来源来自Vn。5、经夹心ELISA检测, Vn在胚胎发育中逐渐被利用,尤其在胚胎发育早期(由3.016μg/egg降到1.601μg/egg)和器官形成期由(1.907μg/egg降到1.394μg/egg)利用率最高。6、测定了长角血蜱胚胎发育过程中的蛋白、糖、脂、水分的变化;初步探讨了胚胎发育中的主要能源物质为蛋白和脂类;糖参与了几丁质的合成;在胚胎晚期,大量的水分用于增加内压使幼虫突破卵壳。7、应用GC/MS技术测定出长角血蜱胚胎发育中的主要化学物质。结果显示:长角血蜱胚胎发育中共有19中化学物质,分别为十七烷酸、二十五烷、棕榈酸等。在胚胎发育的不同时期出现了特定的化学物质,保证了胚胎发育的顺利完成。
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