论文部分内容阅读
目的：Branemark提出的骨整合理论是口腔种植体成功的基础。种植体的表面特征如表面形貌、亲水性、化学组成影响着骨整合的发生。种植体的表面改性-Ti02纳米管可显著促进成骨细胞的生长。亲水性好的种植体表面可诱导矿化物的沉积,使矿化物的矿化面积增大。当种植体植入人体后,血液中的蛋白质首先吸附在种植体表面,吸附的蛋白质将调节细胞的粘附和增殖。在种植体植入人体前,为了减少感染的发生,种植体必须要进行消毒灭菌,那么种植体消毒方法的不同是否会影响种植体表面TiO2纳米管的亲水性以及蛋白质吸附,目前的研究对此报道较少见。因此,本研究从更好的促进骨整合、提高种植体成功率的角度出发,旨在探讨TiO2纳米管的构建及优良的种植体表面预消毒方法,为种植体的临床应用提供理论基础。方法：将纯钛板切割成直径15mm,厚度为0.5mm的试件(共24个)。试件表面经SiC砂纸打磨后,分别用丙酮、乙醇和蒸馏水超声清洗10min。经过打磨清洗的钛片标记为光滑钛。随机选取12个光滑钛片,在20V电压下阳极氧化1h。将阳极氧化的钛片及光滑钛随机各选取一半进行高压灭菌消毒30min,余下的钛片进行紫外线照射,照射时间为48h。选取血清中含量最丰富的白蛋白进行实验,用磷酸缓冲液(PBS,pH7.4)将BSA配制成浓度为1mg/mL的蛋白质溶液。将紫外线照射、高压灭菌的两组Ti02纳米管及光滑钛试件,分别浸泡在装有10mL蛋白质溶液的离心管中,恒温37℃,在10、30、45、60min、2、4、6、12和24h分别测量溶液中BSA的浓度,BSA浓度采用紫外可见分光光度计在278nm波长处进行分析测定。将吸附完成的试件取出,用PBS冲洗3次,室温干燥。将干燥的试件分别放入离心管中,加入10mL的PBS,恒温37℃,在10、30、45、60min、2、4、6、12和24h各取出1mL测量溶液中BSA的浓度,为了保证溶液体积的不变,每次取出的1mL液体在测量结束后倒回原离心管中。BSA浓度采用紫外可见分光光度计在278nm波长处进行分析测定。实验所得数据进行独立样本t检验分析。结果：1.阳极氧化TiO2纳米管的微观形貌光滑钛片经过阳极氧化后,表面生长出致密有序的TiO2纳米管,这些纳米管排列整齐、形貌均一,管径约80～100nm,管壁厚约10nm左右；经过打磨超声清洗的光滑钛片表面只有SiC砂纸打磨的痕迹,没有出现纳米结构。2.消毒后钛表面亲水性检测钛表面经过紫外线照射、高压蒸汽灭菌消毒,两种消毒的钛表面接触角形成了显著地差异,紫外组的TiO2纳米管及光滑钛接触角均小于高压组的接触角(P<0.05)。3.消毒方法对钛表面TiO2纳米管蛋白质吸附能力的影响紫外、高压两组吸附结果显示在各个时间点下,紫外组TiO2纳米管吸附的BSA均高于高压组(P<0.05)；同种消毒方法下,纳米管吸附的蛋白质要多于光滑钛(P<0.05)。4.消毒方法对钛表面TiO2纳米管蛋白质释放的影响蛋白质释放结果显示,24h光滑钛高压组BSA的累积释放率为98%,光滑钛紫外组BSA的累积释放率为80%；24h纳米管高压组BSA的累积释放率为50%,纳米管紫外组BSA的累积释放率为30%。24h光滑钛的BSA释放快于纳米管(P<0.05)；消毒对BSA的释放也产生了影响,高压组BSA的释放快于紫外组(P<0.05)。结论：1.阳极氧化电压为20V时,钛表面可形成管径约为80100nm的纳米管。2.在紫外线照射、高压蒸汽灭菌两种消毒方式下,紫外线照射的具有TiO2纳米管表面形貌的钛种植体,其亲水性好于高压蒸汽灭菌组,并且紫外线照射组白蛋白吸附较多而且牢固。因此,此类种植体在临床应用前使用紫外预消毒灭菌。