目的:通过建立兔心肌急性缺血再灌注模型来研究缺血后适应对心脏的保护作用,同时对其机制进行探讨,从而为临床上运用缺血后适应提供理论基础。方法:60只新西兰大白兔随机分为对照组、缺血后适应组、缺血后适应+PD98059组、缺血后适应+LY294002组和假手术组,每组12只。对照组结扎左前降支30分钟后立即恢复心肌灌注,持续达180分钟。缺血后适应组结扎左前降支30分钟后,实施间断性心肌灌注,方案为:再灌注30秒,再次结扎该血管30秒(重复4次),然后恢复心肌灌注180分钟。缺血后适应+PD98059组仍结扎左前降支30分钟,但在静脉推注PD98059 10分钟后实施间断性心肌灌注,方案同缺血再灌注组。缺血后适应+LY294002组亦结扎左前降支30分钟,在静脉推注LY294002 10分钟后后实施间断性心肌灌注,方案同缺血再灌注组。结扎血管采用“二线二结”法。假手术组仅将线从左前降支周围心肌中穿过,但并不结扎。实验中持续心电监护并于术前、结扎后10分钟和再灌注后120分钟描记II导心电图。实施缺血再灌注各组分别于结扎前和再灌注后60分钟从股静脉取血1ml,假手术组于穿线前和穿线后60分钟同样途径取静脉血1ml,运用ELISA法测定血清肌钙蛋白浓度。再灌注结束后取心肌行相关检查。其中每组中6只兔运用2,3,5—氯化三苯基四氮唑染色测定各组心肌坏死面积,另外六只兔取心肌运用光学显微镜和透射式电子显微镜行组织形态学检查,并提取蛋白,通过Western Blot检测Bad、Akt、P-Akt、ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表达。结果:1.各组兔术前性别、体重和心率无明显差异(P>0.05)。心肌缺血后心率有增快趋势,但与术前比亦无明显差异(P>0.05)。2.血管结扎后四组心电图均可见II导联ST段弓背上抬,再灌注后120分钟四组心电图均可见ST段回落。对照组、缺血后适应+PD98059组再灌注后分别有8只和6只兔ST段下降50%,而缺血后适应组和缺血后适应+ LY-294002组均有10只兔ST段下降50%。但四组间差异不显著(P>0.05)。3.缺血后适应组和缺血后适应+LY294002组心律失常评分明显低于对照组(P<0.05),而缺血后适应+PD98059组与对照组无明显差异(P>0.05)4.血清肌钙蛋白浓度结扎前各组间无明显差异(P>0.05),但再灌注60分钟后对照组、缺血后适应组、缺血后适应+PD98059组和缺血后适应+LY294002组该浓度(ng/ml)分别为:6.63±2.32、3.04±1.10、7.12±2.30和3.52±1.67。缺血后适应组和缺血后适应+LY294002组该值明显低于对照组(P<0.05),而缺血后适应+PD98059组该值与对照组无明显差异(P>0.05)。5.光学显微镜与透射式电子显微镜检测均表明缺血后适应组和缺血后适应+ LY294002组兔心肌细胞损伤较对照组和缺血后适应+ PD98059组轻。6.对照组、缺血后适应组、缺血后适应+PD98059组和缺血后适应+LY294002组心肌梗死面积分别为:23.63±12.08%、10.96±2.07%、25.16±9.3%和12.65±2.0%。缺血后适应组和缺血后适应+ LY294002组兔心肌梗死面积明显减少,与对照组比较有显著性差异﹙P<0.05),而缺血后适应+PD98059组该值与对照组无明显差异(P>0.05)。7.与对照组相比缺血后适应组和缺血后适应+ LY294002组兔心肌Bad蛋白表达明显下降,P-ERK1/2蛋白表达明显增加(P<0.05),而缺血后适应+PD98059组与对照组无明显差异(P>0.05)。四组间兔心肌P-Akt蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论:1.“二线二结”法能够既方便又成功地建立兔在体心脏缺血再灌注模型。2.缺血后适应能明显减少缺血再灌注损伤。3. ERK1/2细胞信号途径参与介导了缺血后适应对兔缺血再灌注心肌的保护作用,PI3K-Akt信号途径可能未参与此保护作用。目的:动物实验已证实缺血后适应能够减少再灌注损伤,但关于它的临床研究还不多见。本研究就其在急诊经皮腔内冠状动脉成形术(PCI)中的价值作一探讨。方法:43名确诊为急性心肌梗死的患者随机分成2组:对照组(18例)接受常规PCI术,缺血后适应组(25例)在行PCI术时于血流开通即刻接受后适应治疗。PCI术后0、8、16、24、32、40、48和72小时取静脉血测血清肌酸磷酸激酶同工酶(CKMB)浓度。入院时和PCI术后24小时取静脉血测血清超敏C反应蛋白(hsCRP)浓度。入院时和术后2小时分别行心电图检查。同时术后24h采用HOLTER记录心律失常事件。术后第7天和6月时行心超和SPECT静息心肌灌注显像。结果:1.两组间在年龄、性别、危险因素、入院时生命体征、缺血时间、冠脉病变情况和植入支架情况等方面均无统计学差异(P>0.05)。2.对照组CKMB峰值高于缺血后适应组(374.9±146.8 vs 280.7±120.0U/L, P=0.026)。对照组CKMB曲线下面积也较缺血后适应组大(8643±3779 vs 6125±2136, P=0.017)。3.两组入院时血清hsCRP浓度无明显差异(5.0±2.8 vs 4.8±2.2 mg/L, P=0.156),但术后24小时缺血后适应组该浓度低于对照组(6.1±4.8 vs 9.6±5.0 mg/L, P=0.025)。4.缺血后适应组术后2小时ST段完全回落者较对照组多(88% vs 55.6%, P=0.04)。5.缺血后适应组各种心律失常事件较对照组少(P<0.05)。6.缺血后适应组术后7天和术后6月时左室射血分数均明显优于对照组(55.04±11.23% vs 47.81±7.78%, P=0.025; 54.70±4.62% vs 49.27±5.57%, P=0.024)。缺血后适应组术后7天和术后6月时WMSI均明显低于对照组(1.27±0.22 vs 1.44±0.30, P=0.039; 1.15±0.12 vs 1.33±0.18, P=0.01)。7. SPECT半定量分析显示缺血后适应组心肌缺血面积、心肌坏死面积和心肌坏死缺血比术后7天为:27±15%、14±11%和46±29%,术后6月为:23±11%、10±8%和38±29%。对照组心肌缺血面积、心肌坏死面积和心肌坏死缺血比术后7天为:37±14%、25±11%和67±20%,术后6月为:34±9%、16±7%和45±17%。术后7天缺血后适应组与对照组相比三组数值测定差异显著(P<0.05)。术后6月缺血后适应组与对照组相比仅心肌缺血面积差异显著(P<0.05)。结论:本研究表明缺血后适应是对常规急诊经皮腔内冠状动脉成形术的改进,该方法既新颖又安全,确实能改善心肌灌注,减轻炎症反应,减少心肌坏死,且可能有长期效应。