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锌指蛋白型转录因子参与调控植物的生长发育，根据所含锌指结构的不同，可将植物C2H2型锌指蛋白分为四类:单锌指类、双锌指类、三个锌指类和四锌指类。已有的研究表明，单锌指类蛋白在植物器官发育中起着重要作用。本人所在研究室前期从豆科植物-百脉根中鉴定出一个参与根和根瘤发育相关的单锌指蛋白LjZFP3，并初步研究了该蛋白结构、表达特征和生理功能（李雪梅硕士论文）。本研究在此基础上，进一步开展了LjZFP3基因在根瘤形成过程中表达特性、LjZFP3蛋白亚细胞定位及突变体表型等方面的研究。主要研究结果如下: 1.利用实时荧光定量PCR技术，检测了LjZFP3基因在百脉根接种根瘤菌后2h、6h、12h、1d、2d、6d、8d在根及根瘤中的表达水平。结果表明:LjZFP3在接种和未接种根中均有表达，而在接种6d后表达量略微上升，直到8d上升到最高。在植株不同器官中呈组成型表达，而在根瘤中的表达量高于根和地上部分。同时，构建LjZFP3Pro∷GUS转录融合载体进行组织化学表达分析。结果表明:LjZFP3主要在根的韧皮部、根瘤原基和正在发育的根瘤表达，成熟和衰老的根瘤中则只在维管束中表达。 2.构建了GFP与LjZFP3的融合表达载体，通过农杆菌转化烟草叶肉细胞瞬间表达，发现LjZFP3定位于细胞核中。进一步通过发根农杆菌毛根转化，将融合表达载体导入百脉根根中，在激光共聚焦显微镜下观察发现LjZFP3也定位于根毛和皮层细胞核中。 3.为了鉴定LjZFP3基因在共生过程中的功能，利用毛根转化技术，进一步验证了LjZFP3过量表达和下调表达对百脉根植株根瘤数的影响。结果表明:LjZFP3过量表达植株结瘤数较对照组显著增多;而LjZFP3基因下调表达后，植株的结瘤能力受到影响，表现为侵入线降低，根瘤原基数量减少。这表明LjZFP3在根瘤的形成过程中具有重要功能。 4.突变体表型分析:从百脉根反转座子LORE1插入突变体库中鉴定到两个突变体，分别命名为Ljzjp3-1（插入在760bp位置）和Ljzfp3-2（插入在548bp位置）。通过鉴定，共获得3株纯合体:Ljzfp3-1得到1株、Ljzfp3-2得到2株。得到纯合突变体种子后，进行结瘤梯度实验，10d时，zfp3-1结瘤数无明显差异，但在21d统计时发现，结瘤数比对照明显减少，zfp3-2表型较明显，与对照比结瘤数显著减少，差异极显著，zfp3-2根长及地上部分也受到影响，这表明LjZFP3在根及根瘤的发育中起着重要作用。