目的：p38MAPK是MAPK(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传导通路超家族的亚类之一，激素、G蛋白偶联受体、以及渗透压在内的许多因素均能激活p38MAPK信号通路，使它在炎症、细胞应激、凋亡、生长等多种生理和病理过程中发挥重要的作用。近年来研究发现，MAPK信号转导通路在天然免疫和特异性免疫应答中起着重要的调节作用。γ-干扰素（γ-interferon, IFN-γ）作为免疫细胞因子，IFN-γ水平的高低可以反映机体细胞的免疫状态。白念珠菌是最常见的院内感染致病菌，研究表明，当机体感染白念珠菌后，细胞免疫在机体抗白念珠菌感染中占主导地位。最近有研究表明，p38MAPK可促进IFN-γ的表达，但在念珠菌病中尚未见报道。本研究通过建立播散性白念珠菌感染小鼠动物模型，采用免疫组织化学染色方法来检测不同感染时间p38MAPK和IFN-γ在小鼠肾脏的表达情况，同时对二者的表达情况进行相关性研究，探讨其在播散性念珠菌病发病中可能的机制，为临床治疗播散性念珠菌病提供新的思路和方法。方法：1菌株白念珠菌，来自于河北医科大学第二医院皮肤性病科真菌室保存菌种。2播散性念珠菌病小鼠模型的建立昆明小鼠90只，雌雄各半，购自河北医科大学动物饲养中心，在河北医科大学第二医院实验中心普通环境下，给予全价配合饲料饲养。经适应环境后，按体重随机分为A、 B、C三组，每组各30只。A组小鼠为实验组：从第1天开始经腹腔注射环磷酰胺200mg/kg·d，连续4天，第5天时，经腹腔注射浓度为1～5×10~6cfu/ml白念珠菌菌悬液1ml/只，共1天。B组为环磷酰胺对照组：从第1天开始小鼠经腹腔经腹腔注射同等量环磷酰胺，连续4天，于第5天再经腹腔注射生理盐水1ml/只，共1天。C组为空白对照组：从第1天开始小鼠经腹腔注入同等量生理盐水，连续5天。于实验第6d、第9d、第20d分批断颈处死小鼠，观察腹腔脏器大体情况。3播散性念珠菌感染小鼠肾脏菌株的鉴定无菌条件下取出小鼠肾脏，无菌生理盐水冲洗数次后，将小鼠一侧1/2肾组织研磨后，接种于沙氏培养基上培养。4组织病理学检查及免疫组化检测另一部分肾组织用10%福尔马林溶液固定，做常规病理HE染色及PAS染色观察小鼠肾脏组织病理变化及白念珠菌感染情况。采用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接法（SP）检测p38MAPK和IFN-γ的表达情况。结果：1播散性念珠菌感染小鼠模型的建立实验过程中，小鼠由于免疫抑制剂环磷酰胺造成多脏器出血、水肿死亡共10只；由白念珠菌播散感染死亡共11只；不明原因死亡共15只。最终，纳入实验小鼠共54只。 A组小鼠从实验第4d开始，精神、食欲差，毛发无光泽，活动差；实验第6d，经解剖后小鼠腹腔内部分脏器水肿明显，肾脏可见少量白色脓点形成；实验第9d，经解剖后，肾脏可见白色脓点生成；第20d，经解剖后，肾脏可见大量白色脓点生成，部分脏器充血、坏死。B组小鼠从实验第4d开始，精神、食欲差，毛发无光泽，活动差，在实验第6d，小鼠肾脏未见明显变化；实验第9d经解剖后，小鼠肾脏水肿明显，体积增大，无白色脓点形成；实验第20d，经解剖后，肾脏水肿，体积增大，无白色脓点形成。C组小鼠组精神、食欲无变化，毛发光泽，活动好，在实验第6d、第9d、第20d经解剖后，小鼠肾脏均呈正常表现。2播散性念珠菌感染小鼠体内肾脏组织真菌培养及鉴定实验组小鼠肾脏第6d、第9d、第20d在沙氏培养基上培养72小时，均可见白色菌落生长，经厚膜孢子琼脂培养基及血清培养法鉴定为白念珠菌。3组织病理学检查A组小鼠，实验第6d，镜下肾脏可见完整肾小球、肾小管结构，PAS染色无紫红色菌丝和孢子；第9d，镜下肾小球、肾小管结构破坏，细胞核固缩，PAS染色可见紫红色菌丝和孢子；第20d，肾小球、肾小管消失，可见坏死形成，PAS染色可见大量紫红色菌丝和孢子；B组小鼠，实验第6d，第9d及第20d，肾小球、肾小管结构均完整，部分细胞变性，胞浆均质红染，胞核完整；C组小鼠镜下均呈正常表现。4p38MAPK在蛋白水平表达情况免疫组织化学检测小鼠肾脏组织中的p38MAPK主要在细胞胞浆中表达，阳性细胞可见胞浆染成棕黄色；免疫组化染色结果显示，A、B、C组均可见阳性细胞表达。A组：实验第6d、第9d、第20d OD值分别为0.1727±0.0089、0.1799±0.0102、0.1638±0.0079，表达呈先上升后下降趋势，P<0.05，差异有统计学意义。B组：实验第6d、第9d、第20d OD值分别为0.1697±0.0074、0.1763±0.0149、0.1618±0.0043，表达呈先上升后下降趋势，P>0.05，差异无统计学意义。C组：实验第6d、第9d、第20dOD值分别为0.1594±0.0033、0.1659±0.0056、0.1609±0.0097，表达无明显变化，P>0.05，差异无统计学意义。实验第6d，A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P<0.05，差异有统计学意义，实验第9d，A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P>0.05，差异无统计学意义，实验第20d，A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P>0.05，差异无统计学意义。重复测量设计资料方差分析：各组不同时间点之间存在差别，P<0.05，差异有统计学意义；总体比较不同组间存在差别，P<0.05，差异有统计学意义；进一步两两比较：A组与C组，P<0.05， B组与C组，P<0.05，差异均有统计学意义。5IFN-γ在蛋白水平表达情况免疫组织化学检测小鼠肾脏组织中的IFN-γ表达主要在细胞胞浆中表达，阳性细胞可见胞浆染成棕黄色；免疫组化染色结果显示，A、B、C组均可见阳性细胞表达，A、 B、C组阳性细胞表达呈上升趋势。A组：实验第6d、第9d、第20d OD值分别为0.1967±0.1236、0.2108±0.0183、0.1705±0.0171，表达呈先上升后下降趋势，P<0.05，差异有统计学意义；B组：实验第6d、第9d、第20d OD值分别为0.1725±0.0179、0.1843±0.0226、0.1650±0.0090，表达呈先上升后下降趋势， P>0.05，差异无统计学意义；C组：实验第6d、第9d、第20d OD值分别为0.1588±0.0080、0.1841±0.0132、实验第6d， A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P<0.05，差异有统计学意义，实验第9d，A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P<0.05，差异有统计学意义，实验第20d，A、B、C组OD值相比呈逐渐下降趋势，P>0.05，差异无统计学意义。根据重复测量设计资料方差分析得出，各组不同时间点之间存在差别，P<0.05，差异有统计学意义；总体比较不同组间存在差别， P<0.05，差异有统计学意义；进一步两两比较，A组与C组，P<0.05， A组与B组，P<0.05，差异均有统计学意义。6p38MAPK与IFN-γ的相关性结果实验组在实验第6d，曲线拟合得出，r=0.00，P>0.05，差异无统计学意义，二者无明显相关；实验第9d，曲线拟合得出，r=0.1761，P>0.05，二者无明显相关；实验第20d，曲线拟合得出，r=0.2408，P>0.05，二者无明显相关。结论：1p38MAPK在播散性念珠菌病小鼠肾脏的表达，感染早期呈上升趋势，晚期呈下降趋势。2IFN-γ在播散性念珠菌病小鼠肾脏的表达，感染早期呈上升趋势,晚期呈下降趋势。3p38MAPK与IFN-γ的表达在感染晚期均呈下降趋势，可能是导致肾脏白念珠菌侵袭性感染的原因之一。4播散性念珠菌病小鼠肾脏IFN-γ的表达与p38MAPK的表达不相关，说明IFN-γ的表达可能不是通过P38MAPK信号途径激活引起。