晚期结肠肿瘤患者化疗前后血浆DNA定量检测及临床特征分析

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研究背景近年来,随着我国医疗技术的不断发展,人们的生活也发生了很大的变化,方面是环境的污染加重,另一方面人们消费水平不断提高,不规律的饮食及各种食品添加剂以及农药残留等造成了消化道肿瘤发生率在全国甚至世界范围内的升高,而我国是消化道肿瘤(尤其是结肠肿瘤)发病率较高的国家之一。根据我国相关资料记载:在消化道肿瘤中结直肠癌、胃癌、食管癌成为了威胁我国居民健康的主要疾病。目前,对于结肠肿瘤的诊断和治疗临床上还没有理想的方法,传统的方法主要以内镜检查加活检为主,但是这种方法创伤较大,病人痛苦大,部分病人难以耐受,且病人需要禁食及肠道准备等,部分患者会因此出现电解质紊乱,如果补液不及时还可因血液浓缩出现血栓性疾病。因此,临床上研究适用范围广、痛苦小、准确度高、成本低的诊断方法显得至关重要。近年来,医学界对于肿瘤患者血浆DNA的研究较多。早在1947年著名学者Mandcl和Metals等人就通过实验发现了循环核酸的存在。30年后,Leon等人实验又发现肿瘤患者中的血液循环DNA的水平要明显高于正常人水平(P<0.05)。对于健康人来说,血浆DNA多数游离在外周,且它们多数来源于血细胞,而肿瘤患者血浆DNA则来自肿瘤细胞。根据相关实验结果显示:肿瘤患者循环血中存在着的大量DNA,其来源可能通过以下途径:(1)循环血或微转移能够溶解肿瘤细胞;(2)肿瘤细胞自身的凋亡或坏死;(3)肿瘤细胞通过自身繁衍不断向循环血液中释放DNA;(4)肿瘤细胞受到药物或者其他侵袭造成周围细胞、组织发生变性而向循环血中释放DNA;(5)淋巴细胞与肿瘤细胞的相互作用。由此可见,肿瘤患者血浆DNA的形成原因或途径是多方面的,其结果也是比较复杂的。著名学者Domirguez等人进行了一项实验,实验中分别检测同一组患者的血细胞、肿瘤组织和血浆中DNA变异,结果显示:27例膀胱癌患者中有17例被检出血浆DNA与肿瘤组织DNA发生相同的改变。Szymanska等检测的29例肝细胞癌患者血浆与肿瘤DNA变异一致性达88.5%,这些实验都有力的说明了肿瘤患者中血浆DNA主要来自肿瘤细胞。因此,临床上,通过对血浆DNA进行定量或定性分析对肿瘤的早期诊断、治疗及预后的评价都具有重要意义。目的:对结肠肿瘤患者的血浆DNA进行检测,分析血浆DNA与结肠肿瘤的病理特征和二者之间的关系,探讨血浆DNA定量或定性分析对结肠肿瘤的早期诊断、治疗及预后的价值。方法:分析自2012年11月至2013年10月接收治疗的40例结肠肿瘤患者入院资料进行分析,这些患者均符合结肠癌临床诊断标准,患者中有男性27例,女性13例,患者的年龄在29-74岁之间,他们的平均年龄为48.4±1.5岁。实验中,医护人员对患者采集肘静脉血,EDTA-K2抗凝,并在常温下对其离心10min,然后对上层血浆在4℃下离心10min。然后,采用含内参照双重荧光定量PCR进行血浆DNA定量检测,并根据影像学检查结果对肿瘤患者进行分期(依照AJCC癌症分期手册(第七版))。实验中设置对照组40例,为同期体检的健康人,其中男性19名,女性21名,年龄30-88岁,他们的平均年龄为47.4±1.6岁。两组患者年龄、入院时间等资料经分析指标间没有统计学意义(P>0.05)。结果:实验中,两组患者试验均取得成功,实验结果显示:结肠肿瘤患者(49.9)(30.2-61.3)ng/m1血浆DNA含量要明显高于对照组(健康者)为18.2(13.9-26.2)ng/ml(P<0.05)。在结肠癌患者中血浆DNA含量与肿瘤临床分期和分级有关(P<0.05),患者体内血浆DNA的含量与患者的年龄、性别、肿瘤大小无统计学差异(P>0.05),但晚期、分化差的结肠肿瘤患者其体内的血浆DNA水平会出现上升趋势。实验中,采用非参数ROC分析血浆DNA定量对消化道肿瘤患者的诊断效能,其曲线下面积(AUC)及诊断敏感度均优于传统指标血清CEA。由此说明,对于结肠肿瘤患者,临床上对患者进行血浆DNA定量、定性检测价值更大,效果更好。结论:临床上,对于结肠肿瘤患者而言,其体内的血浆DNA要明显高于对照组患者。它对于结肠肿瘤患者的临床诊断和治疗有一定的价值(能够作为确诊结肠肿瘤的生化指标之一)。此外,血浆DNA水平在结肠肿瘤患者中较正常工作健康人群中明显升高,它对于结肠肿瘤具有重要的诊断价值。对于怀疑或者不能确诊的肿瘤患者,医护人员应该尽早检测患者血浆DNA,避免漏诊或误诊。
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