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目的:外阴癌是重要的妇科恶性肿瘤,好发于绝经后妇女,90%为鳞状细胞癌。由于早期症状不典型,患者就诊时大多已处于晚期。虽然标准手术治疗可有效延长患者5年生存率,但同时造成相当大的术后并发症,严重影响患者生理及心理健康。同时,外阴癌术后复发、转移也是目前较为棘手的问题。然而关于外阴癌的发病机制仍不清楚。因此明确其发病机制不仅是临床研究的热点与难点,更是外阴癌进一步诊断、治疗及预防复发转移等亟待解决的问题。长链非编码RNA H19(longnoncoding RNA H19,lncRNA H19)在多种肿瘤组织中存在异常表达,现已发现lncRNAH19参与宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌等多种妇科恶性肿瘤的发生发展,然而其在外阴癌中的研究国内外尚未报道。因此,本研究探索lncRNA H19在外阴鳞癌(vulvarsquamous cell carcinoma,VSCC)中的表达,并分析其对VSCC细胞系A431生物学行为的影响,以待从全新的角度阐明VSCC发生发展的分子机制。 研究方法:1、收集外阴鳞癌组织及癌旁组织(癌旁组织距离肿瘤>5cm)标本各25例。所有癌组织标本术后病理诊断均为鳞状细胞癌,术前均未行放疗或化疗。2、采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA H19在外阴鳞癌组织及癌旁组织中的表达水平,并分析其表达量与患者临床病理特征的关系。3、培养VSCC细胞系A431和人正常表皮细胞Hacat,并检测lncRNA H19的表达水平。4、lncRNA H19特异性siRNA按一定条件转染A431细胞,同时设立阴性对照组(转染阴性对照siRNA)和空白组(对细胞只加脂质体)。5、采用实时荧光定量PCR法检测A431细胞中lncRNA H19的沉默效率。6、采用Transwell实验检测lncRNA H19对A431细胞迁移能力的影响;采用CCK8检测对A431细胞增殖能力的影响;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记实验分析对A431细胞凋亡的影响,分别设计实验组、阴性对照组和空白组。 结果:1、LncRNA H19在外阴鳞癌组织中的表达高于癌旁组织,并且与淋巴结转移、病理分期呈正相关(P<0.05);2、LncRNA H19在A431细胞中的表达较Hacat细胞明显增高(P<0.05);3、沉默lncRNA H19的表达可以抑制A431细胞增殖、迁移,促进凋亡,且差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论:LncRNA H19在外阴鳞癌组织中高表达并且参与外阴鳞癌的增殖、迁移及凋亡过程的调控。