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【目的】制备靶向EGFR的分子造影剂C225-USPIO,检测其对A549细胞的靶向效果;并初步探索体外实验的合适浓度。【方法】1.通过碳二亚胺法将超小型超顺磁性氧化铁颗粒USPIO与西妥昔单抗C225、抗人IgG连接制备MR分子对比剂C225-USPIO及IgG-USPIO,后者为对照组,根据Fe含量设置不同浓度梯度;2.培养肺癌A549细胞,免疫细胞化学方法(S-P法)检测其细胞膜表面EGFR表达水平;3.用免疫荧光染色法及流式细胞术检测A549细胞与C225-USPIO的结合率,测定对比剂的抗体活性,并探索对比剂最佳的含Fe浓度;4.按Fe浓度为50μg/ml将C225-USPIO与A549细胞培养1h后行普鲁士蓝染色、透射电镜检测C225-USPIO进入细胞内的情况和活性;5. 4.7T磁共振扫描检测造影剂对细胞的靶向显像效果,扫描对像分别为标记了对比剂C225-USPIO的细胞、标记IgG-USPIO的细胞以及蒸馏水,扫描序列包括轴面T1WI、T2WI。【结果】1.免疫细胞化学检测肺癌A549细胞EGFR表达呈阳性;2.免疫荧光染色法及流式细胞检测显示细胞与不同浓度C225-USPIO结合率均较对照组高,当Fe浓度为0.1mg/ml时,荧光强度及结合率较佳;3.铁染色及透射电镜显示肺癌A549细胞对比剂C225-USPIO组细胞膜表面及细胞质中的囊泡内Fe粒子含量较对照组高;4. 4.7T磁共振扫描显示较未标记的细胞相比,C225-USPIO与细胞培养后T2WI信号明显下降,但三个时间梯度之间无明显差异。【结论】本实验成功构建了靶向肺癌A549细胞的分子显像剂C225-USPIO,该显像剂对肺癌A549细胞具有良好的靶向性和特异性,明显降低磁共振T2值,这种分子造影剂为肺癌EGFR表达水平检测提供了新的方法,为下一步裸鼠移植瘤实验提供了依据。