甲基莲心碱保护LPC诱导的内皮细胞损伤及其机制的研究

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目的:观察甲基莲心碱对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导血管内皮细胞损伤的保护作用,并对其作用机制进行研究。方法:以10μg/ml的LPC作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞共孵育24小时诱导内皮细胞损伤,建立细胞损伤的模型;以0.1、1.0、10.0μmol/l的甲基莲心碱预先作用于HUVEC细胞1小时,再予10μg/ml的LPC作用于HUVEC细胞共孵育24小时;并设立空白对照组及甲基莲心碱(10.0μmol/l)组;收集细胞上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(No)、丙二醛(MDA)和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)浓度,收集细胞测定细胞内活性氧(ROS)水平。用分光光度计法测定LDH漏出量;硝酸还原酶法检测细胞上清液中NO的含量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中MDA的含量;高效液相色谱法检测细胞上清液中ADMA;荧光法测定细胞内ROS水平。结果:1.与对照组比较,LPC(10μg/ml)作用于HUVEC-12细胞24小时后,显著性增加细胞培养上清液中LDH含量(P<0.05)、MDA含量(P<0.05)、ADMA含量(P<0.05)及细胞内ROS水平(P<0.05),显著性降低细胞培养上清液中NO含量(P<0.05)。2.与LPC损伤组比较,0.1、1.0、10.0μmol/l的甲基莲心碱预先作用于HUVEC-12细胞1小时,再予终浓度为10μg/ml的LPC作用于HUVEC-12细胞共孵育24小时,均能显著性降低细胞培养上清液中LDH含量(P<0.05)、MDA含量(P<0.05)、ADMA含量(P<0.05)及细胞内ROS水平(P<0.05),显著性升高细胞上清液中NO含量(P<0.05)。3.与对照组比较,甲基莲心碱(10.0μmol/l)本身对细胞上清液中LDH含量(P>0.05)、NO含量(P>0.05)、MDA含量(P>0.05)、ADMA含量(P>0.05)及细胞内ROS水平(P>0.05)没有显著性差异。结论:1.甲基莲心碱对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用。2.甲基莲心碱保护LPC诱导血管内皮细胞损伤与其抗脂质过氧化作用及降低ADMA水平有关。
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