柑橘溃疡病由黄单胞杆菌属Xanthomonas citri subsp. citri引起,为检疫性细菌病害,防治困难,对柑橘产业危害极其严重。冰糖橙是湖南省选育并重点推广的优良甜橙品种,但其叶片、枝条、果实极易感染溃疡病,果面病斑会严重降低其商品价值。在生产上,柑橘溃疡病主要依赖于化学防治来控制,大量化学农药的使用容易造成环境污染和果品农残超标等问题。选育抗病品种成为根治溃疡病的唯一途径。因此,本文从T-DNA插入突变、辐射诱变以及化学诱变三个途径对甜橙多种材料进行突变体的诱导,并通过离体接种、活体接种及分子水平检测其对溃疡病菌的抗性,以期获得较为稳定的抗性材料,为柑橘对溃疡病的抗病机理研究提供重要研究资源；同时探讨了感病品种冰糖橙与溃疡病菌的共生互作关系。其主要研究结果如下：1.以激活标签载体PSKI074-GUS对冰糖橙胚性愈伤组织悬浮系及大红甜橙实生苗进行遗传转化,经GUS染色检测到38株GUS阳性株系,对其进行RT-PCR检测时有5株扩增出目的片段pdtⅡ。采用叶片离体接种溃疡病菌的方式检测后发现此5个株系均为感病株系。2.分别采用不同剂量γ射线对冰糖橙接穗进行诱变后,高接于新生系碰柑或嫁接于一年生枳,共获得7463个诱变枝梢。采用108 CFU/ml的溃疡病菌对以上样本进行3次离体接种验证后,获得8个叶片接种后未出现溃疡病典型病斑的样本。对8个样本进行活体接种验证后,1-3-5、2-6-8、199三个诱变株对溃疡病具有一定的抗性。1-3-5叶片的接种部位出现坏死斑,CERK1基因有上调表达趋势。2-6-8接种部位症状较轻,CERK1基因有下调趋势但LYP2基因有上调表达趋势。199接种后发病时间与冰糖橙相比较晚,CERK1基因及ZYP2基因均有上调表达趋势。3.EMS诱变剂处理大红甜橙种子时,种子的萌发时间随着处理浓度的增加而延迟：种子的萌发率和出苗率随着处理浓度的增加而降低。将诱变得到的732株大红甜橙实生苗进行溃疡病菌的离体接种验证,经3次筛选后1-9-7、2-8-4、3-24-7表现出稳定抗性,接种时针刺孔处出现褐变,未表现溃疡病典型症状。但进行活体接种验证时,3个株系均出现了典型病斑。4.冰糖橙愈伤组织接种溃疡病菌时,CERK1和LYP2基因均出现了下调表达趋势,同时观察到溃疡病菌的快速生长现象。而抗病材料枸橼C-05愈伤组织与溃疡病菌互作时,CERK1和LYP2基因出现上调表达趋势,同时可观察到褐化现象。5.冰糖橙愈伤组织或叶片均对溃疡病菌生长有促进作用,与对照相比达到极显著水平；愈伤组织悬浮液能够增强溃疡病菌生物被膜合成；叶片提取液也起到促进溃疡病菌胞外多糖的合成作用；且这种促进物质为扩散型、热不稳定。抗病的枸橼C-05愈伤组织或叶片均能够在培养过程中产生抑制溃疡病菌生长物质,与对照相比均可达到极显著水平；且这种物质可以在愈伤组织或叶片生长过程中不断积累。6.将培养溃疡病菌的上清滤液浓缩10倍后作为Xcc粗提物,以此粗提物对冰糖橙叶片接种后发现症状与接种溃疡病菌相似,会出现水渍状及黄色晕圈,但不会出现愈伤状突起；将枸橼C-05、冰糖橙及金柑的嫩梢培养在含有10%Xcc粗提物的溶液中发现,7d后金柑与冰糖橙均有落叶、茎段坏死的症状,而枸橼生长良好。Xcc粗提物可以作为筛选抗溃疡病突变体的筛选压力。当冰糖橙愈伤组织悬浮系在含有10%Xcc粗提物的悬浮培养液中悬浮培养3周后,可完全致死。7.EMS诱变剂对冰糖橙愈伤组织悬浮培养系有致死作用,通过冰糖橙愈伤组织悬浮系对EMS的敏感性试验后发现,最佳半致死浓度为1.5%,处理时间为1h。将EMS处理后的冰糖橙愈伤组织在含有10%Xcc粗提物悬浮培养基中筛选3周后,再生得271个抗性株系。将271个株系在10%Xcc粗提物中再次筛选2个月后,存活19个株系。对此19个株系进行溃疡病菌的离体接种后发现7个株系表现出对溃疡病的抗性。最后通过活体接种验证后,得到1个稳定抗溃疡病的株系。