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本试验通过生长试验和攻毒试验研究磷对生长中期草鱼生产性能、疾病抵抗力、肠道健康、鳃健康、机体健康和肌肉品质的作用及机制。试验选取体重为256.22 ± 0.60 g的生长中期草鱼540尾,随机分成6个处理,每个处理3个重复,分别饲喂含有效磷 0.95、2.46、3.96、5.68、7.10 和 8.75 g/kg(总磷水平分别为 2.3、4.0、5.6、7.6、9.2和11.0 g/kg)的饲粮60天,考察磷对生长中期草鱼生产性能和肌肉品质的影响。生长试验结束后,分别进行14天的嗜水气单胞菌攻毒试验和3天的柱状黄杆菌攻毒试验,通过考察草鱼肠道、鳃、皮肤、头肾和脾脏中抗菌物质、炎症反应、抗氧化损伤能力、凋亡相关指标和紧密连接蛋白以及相关信号分子,研究磷对鱼类肠道、鳃和机体健康的作用及其机制。生长试验结果表明:与磷缺乏组(有效磷0.95 g/kg)相比,适宜水平的磷提高了生长中期草鱼增重百分比(PWG)、采食量(FI)、饲料效率(FE)和特异生长率(SGR)(P<0.05),表明磷提高了生长中期草鱼生产性能。适宜水平的磷还提高了生长中期草鱼肌肉蛋白、必需氨基酸、风味氨基酸和多不饱和脂肪酸含量、pH、和羟脯氨酸含量,降低了剪切力、蒸煮损失、乳酸含量、组织蛋白酶B和L活力以及饱和脂肪酸含量,提高了肌肉品质;并且磷还通过增强Keap1/Nrf2信号上调CuZnSOD等抗氧化酶基因表达和活力,降低氧化损伤,提高了肌肉品质。同时,适宜水平的磷降低了肠炎、烂鳃和赤皮发病率(P<0.05),表明磷能够增强草鱼抵抗肠炎、烂鳃和赤皮发生的能力。鱼体抵抗肠炎、烂鳃和赤皮发生的能力分别与肠道健康、鳃健康和机体健康有关。本试验结果表明:适宜水平的磷提高了草鱼肠道、鳃、皮肤、头肾和脾脏中抗菌化合物溶菌酶(LZ)和酸性磷酸酶(ACP)的活力,补体C3、C4和免疫球蛋白M(IgM)的含量,上调部分抗菌肽如肝表达抗菌肽(LEAP)-2A、LEAP-2B和β防御素(β-defensin-1)的基因表达,表明磷能增强鱼类的抗菌能力。同时,适宜水平的磷可能通过下调草鱼肠道、鳃、皮肤、头肾和脾脏中信号分子抑制蛋白κB激酶β(IKKβ)、IKKy和核因子-κB(NF-κB)p65的基因表达以及上调了核因子κB抑制蛋白α(IκBα)基因表达下调了促炎细胞因子白介素(IL)1β(除了后肠)、IL-6(除了鳃)、IL-15、IL-17D(除了鳃)和干扰素γ2(IFN-γ2)的基因表达;通过上调信号分子TOR和S6K1基因表达以及下调了其下游4E-BP基因表达上调了抗炎细胞因子IL-4/13A、IL-10、IL-11、TGF-β1和TGF-β2的基因表达,表明适宜水平的磷可能通过NF-κB和TOR信号途径抑制鱼类黏膜免疫器官和机体免疫器官的炎症反应。进一步的研究发现:适宜水平的磷可通过抑制草鱼肠道、鳃、皮肤、头肾和脾脏Fas配体(FasL)和半胱天冬酶-8(caspase-8)介导的死亡受体途径以及促凋亡蛋白凋亡酶激活因子1(Apaf-1)、B细胞淋巴瘤蛋白2相关X蛋白(Bax)家族和caspase-9介导的线粒体途径,下调caspase-3和-7的基因表达,抑制细胞凋亡,增强了其细胞结构完整性;还可能通过上调其核因子相关因子2(Nrf2)基因表达提高抗氧化酶锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)(除了脾脏)、谷胱甘肽过氧化物酶GPx(1a、1b)和谷胱甘肽硫转移酶GST(R、01、02、P1、P2)的mRNA水平和酶活力,从而减少活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、蛋白羰基(PC)含量,提高了鱼类抗氧化能力,降低了氧化损伤。同时,适宜水平的磷可能通过下调肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号促进紧密连接蛋白闭锁连接蛋白(ZO)、occludin(除了前肠和中肠)、claudin-c、-f、-7和-11基因表达,抑制孔隙紧密连接蛋白claudin-12基因表达,维持了细胞间结构完整性。综上所述,饲粮磷能够提高生长中期草鱼的生产性能,并通过增强草鱼肌肉中抗氧化能力,改善其理化指标特性、风味氨基酸以及保健脂肪酸组成,增强肌肉品质。这与其通过提高生长中期草鱼肠道、鳃和机体健康增强抵抗肠炎、烂鳃和赤皮发生的能力有关:(1)适宜水平的磷提高了肠道、鳃、皮肤、头肾和脾脏抗菌物质活力、含量和基因表达,提高了抗菌能力,并通过调控NF-κB与TOR信号分别抑制促炎细胞因子和促进抗炎细胞因子的基因表达,缓解炎症反应。(2)适宜水平的磷可能通过Nrf2信号途径上调SOD等抗氧化酶基因表达和提高其活力,增强自由基清除能力,从而降低了氧化损伤,并通过抑制死亡受体和线粒体途径抑制了细胞凋亡,维持了细.胞结构完整性;还可能通过抑制MLCK信号加强细胞间紧密连接蛋白屏障功能,维持了细胞间结构完整性。最后,以PWG和抵抗肠炎、烂鳃和赤皮发生能力为标识确定生长中期草鱼(254-898 g)有效磷的需要量分别为4.10、4.68、5.77和4.13 g/kg饲粮。