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Orexin是近年发现的一种神经肽，分为orexin A和orexin B。Orexin通过其受体发挥作用，参与机体摄食、能量稳态、睡眠和觉醒周期、生殖、内脏活动和神经内分泌等方面的调节。Orexin在大鼠、小鼠和羊等动物的分布定位文献中已有报道。有关orexin参与生殖调控的资料大多数是在羊、鼠和人上获得的，并且资料有限。关于orexin受体在猪体内的分布定位及其参与猪生殖调控的研究文献中未见报道。因此，本实验以苏种猪为研究对象，采用免疫组织化学法、RT-PCR和放射免疫测定法(RIA)等研究了orexin受体在猪体内的分布定位，发情周期不同时期orexin及其受体的变化规律以及侧脑室注射orexin A后对下丘脑和垂体中相关神经肽的表达和血清LH水平的影响，以期为orexin调控猪的生殖活动提供生理学和形态学资料。一、Orexin受体在猪体内的分布定位本实验用免疫组织化学方法研究了12头(雌雄各半)1～2月龄苏钟猪脑、脊髓、部分内脏器官和内分泌腺内orexin受体(OXR)的分布定位，结果如下：1 Orexin受体1(OX1R)在猪前脑、脑干、脊髓、部分内脏器官和内分泌腺均有分布。在前脑OX1R免疫阳性神经元主要分布于下丘脑前区、视上核、室旁核、室周核、弓状核和结节乳头体核。在丘脑室旁核和斜角带也有分布。在脑干，主要分布于中缝苍白核和蓝斑；在内脏器官，主要分布于卵巢、睾丸、附睾、十二指肠、空肠、回肠、结肠、胰和肾；在内分泌腺，主要分布于垂体和甲状腺。2 Orexin受体2(OX2R)在猪前脑、脑干、部分内脏器官和内分泌腺均有分布。在前脑，OX2R免疫阳性神经元主要分布于猪下丘脑前区、视前区、视上核、视交叉上核、室周核、室旁核，在丘脑背内侧核、嗅结节和斜角带也有分布。在脑干，主要分布于舌下神经核和迷走神经背侧运动核；在内脏器官和内分泌腺，主要分布于肺、小肠、垂体和肾上腺等。OX1R和OX2R的分布存在差异。二、Preproorexin和OX1R mRNA在苏钟猪发情周期不同时期下丘脑-垂体-卵巢轴中的表达为了探讨orexin与生殖的关系，本实验用相对定量RT-PCR方法，对16头苏钟母猪在发情周期不同时期(发情前期、发情期、发情后期和间情期，n=4)下丘脑、垂体和卵巢中preproorexin和OX1R mRNA表达的变化规律进行了研究，结果如下：1 Preproorexin mRNA和OX1R mRNA在苏钟母猪下丘脑、垂体和卵巢(HPG轴)均有表达，而且在生殖周期不同时期呈现规律性变化。2 Preproorexin mRNA在母猪发情前期的HPG轴中表达最高，随后在发情期开始下降，在发情后期降到最低，而在间情期又逐渐上升。3 OX1R mRNA在发情前期的HPG轴中表达量最低，在发情期开始上升，在发情后期达到最高，随后，在间情期开始下降，至发情前期降到最低。4 Preproorexin的表达与OX1R的表达呈互补关系，提示orexin通过OX1R发挥作用。三、去卵巢猪侧脑室微量注射orexin A对血清LH水平的影响为了探讨orexin A对促黄体生成素(LH)的影响，本实验用RIA法，检测了10头去卵巢苏钟母猪侧脑室注射orexin A或生理盐水(对照组)(n=5)前1.5 h至注射后3 h(血样每10 min采集一次)血清中LH浓度的变化，结果如下：1侧脑室注射orexin A后，可以短期地促进LH的分泌释放。2侧脑室注射orexinA 10 min后，血清LH浓度开始上升，在0.5 h达到高峰，1.5 h后基本恢复至注射前水平。四、侧脑室注射orexin A对去卵巢苏钟母猪下丘脑和垂体中生殖激素和相关神经肽mRNA表达的影响为了探讨orexin A对生殖调控的途径。本实验用相对定量RT-PCR方法，研究了10头去卵巢苏钟母猪侧脑室注射orexin A或生理盐水后，对下丘脑GnRH、NPY和POMC mRNA及垂体LH、FSH、POMC和ghrelin mRNA表达的影响，结果如下：1侧脑室注射orexin A后，可促进下丘脑GnRH mRNA的表达，但降低NPY和POMC mRNA的表达。2侧脑室注射orexin A后，可促进垂体LH和FSH的表达，但对FSH的作用差异不显著(p>0.05)，可降低ghrelin和POMC的表达，但对POMC的作用差异不显著(p>0.05)。上述研究表明，orexin受体在猪下丘脑、垂体和卵巢均有分布，为orexin参与生殖调控提供了形态学依据。Preproorexin mRNA和OX1R mRNA在不同发情周期猪下丘脑、垂体和卵巢的表达呈现规律性变化，提示orexin可能与某些生殖激素的分泌有关。侧脑室注射orexin A后，orexin能促进下丘脑GnRH mRNA的表达，促进垂体LH mRNA的表达和升高血清LH的水平，同时也影响下丘脑和垂体NPY、POMC和ghrelin等神经肽的表达，后者也影响GnRH和LH的释放，提示orexin既可直接影响GnRH和LH的释放，又可通过NPY、POMC和ghrelin间接影响GnRH和LH的释放，从而影响生殖活动。这些资料为orexin参与生殖调控提供了生理学资料。