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病毒性疾病对人类健康和生命造成了莫大威胁,新型抗病毒感染药物的研究一直是热点领域之一。本研究组在以Hsp90为靶点的抗病毒药物研究中,筛选得到了若干抗病毒活性强和抗病毒谱广的格尔德霉素(GM)衍生物GM-AMPL、LD01、 GM-GP和GM-TC等。另外,在进行新核苷衍生物的合成与筛选研究中,得到的替诺福韦长链烷基单酯衍生物ODE-TFV显示有进一步开发研究价值。在前期工作的基础上,为充分阐述抗病毒活性化合物GM-AMPL、LD01、GM-GP和GM-TC的开发应用前景,本论文对其前期成药性进行了综合评价研究。同时,为配合进一步研发工作的需要,对抗病毒候选药物ODE-TFV的分析检测及质量控制方法进行了研究。第一部分是格尔德霉素衍生物GM-AMPL、LD01、GM-GP和GM-TC的合成及成药性研究。在前期研究的基础上,对上述GM衍生物的合成制备、理化性质与稳定性、体内抗鸭肝炎病毒活性、口服吸收、小鼠急性毒性、对Beagle犬呼吸与心血管系统毒性等进行了前期综合评价研究。理化性质与稳定性：GM-AMPL、LD01、GM-GP和GM-TC在水及正辛醇中的溶解度分别为0.41及0.78、5.41及8.38、3.30及0.0082和2.62及0.22mg/ml,普遍较先导物GM(0.13及0.041mg/m1)明显提高；GM-AMPL的甲醇溶液经4500Lx光照1h降解不到3%,相同条件下,GM降解接近50%。体内抗DHBV效果：采用鸭肝炎模型动物,分别灌胃给予不同剂量(0.05、0.025和0.0125mmo1/kg)的GM-AMPL、LD01、 GM-GP和0.2mmol/kg的对照药拉米夫定(3TC),1天2次,连续10天。分别在给药前(T0)、给药后5天(T5)、给药后10天(T10)和停药后3天(P3),取血分离血清,测定药物对鸭血清乙型肝炎病毒DNA(DHBV-DNA)的影响。实验结果显示,与病毒对照组相比,不同实验剂量下,GM-AMPL、LDO1及GM-GP均显示显著的抑制鸭血清DHBV DNA的作用,在0.05mmol/kg剂量下的DHBV抑制活性强于/相当于对照药3TC,停药后3天鸭血清DHBV水平无反跳。测试的GM化合物中,GM-AMPL的体内抑制鸭血清DHBVDNA的效果最强。口服生物利用度：SD大鼠单次灌胃给药GM-AMPL(25mg/kg)、LD01(25mg/kg)和GM-GP(7.5mg/kg)的生物利用度分别为26.36%、1.72%和8.89%。小鼠单次给药的急性毒性：对比研究了小鼠静脉和腹腔注射给药GM-AMPL、LD01、GM-GP的急性毒性。GM-AMPL、LD01、GM-GP单次静脉注射给予小鼠的LDso分别为152.6、82.01和19.2mg/kg,单次腹腔注射的LDso分别为295.4、203.8和35.5mg/kg。对Beagle犬呼吸和心血管系统的毒性：用累计给药方法进行不同剂量试验,给药后5-180min期间连续采集Beagle犬血压、心电、呼吸等各项指标的数据,在药后不同时间点对动物血压、心电、呼吸指标进行了测量、分析和评估。结果显示,GM-AMPL:单次静脉注射剂量分别为5、10、15、20μg/kg和10mg/kg。注射15μg/kg在给药后2min内可引起Beagle犬血压明显下降,呼吸频率加快；注射20μg/kg后,可引起心率减慢,血压明显下降,呼吸频率加快；注射10mg/kg后可引起动物死亡。对Beagle犬呼吸和心血管系统无明显影响的安全剂量小于15.0μg/kg；LD01：单次静脉注射药1.0μg/kg和0.5、2.0、8.0mg/kg,在给药后均可引起Beagle犬心率减慢,血压明显下降,呼吸频率加快；对Beagle犬呼吸和心血管系统无明显影响的安全剂量小于1.0μg/kg；GM-GP:单次静脉注射给予Beagle犬10、11、16、21和25μg/kg,在给药后2min内即可引起心率减慢,血压明显下降,呼吸频率加快；单次静脉注射对Beagle犬呼吸和心血管系统无明显影响的安全剂量小于10μg/kg。第二部分是非环核苷衍生物ODE-TFV分析检测方法的摸索。为配合进一步研究开发工作需要,论文对抗病毒侯选药物ODE-TFV的纯度及主要有关杂质分析检测方法进行了探索研究,研究内容主要包括：ODE-TFV的理化性质与稳定性、主要有关物质分离分析与纯度检测方法、光学异构体的拆分等。研究结果显示：ODE-TFV在中性水中难溶,但由于其分子结构中有一游离磷酸羟基呈现较强酸性,因此,其在水中的溶解性与pH有关,随着碱性升高其溶解性增大。ODE-TFV在单一溶剂乙醇或氯仿中加热都可溶解、易溶于乙醇和氯仿(20/80)的混合溶液。ODE-TFV制备过程中涉及到的中间体及可能副产物的理化性质差别很大,而且,产品具有光学活性,因此,目标药物的纯度检测及主要有关杂质分析方法比较复杂。采用HPLC梯度洗脱法,成功实现了对具有紫外吸收的主要有关物质的分离分析检测。确定了关键中间体TFV的光学拆分条件,用于对目标药物光学纯度的暂时控制测定法。考察了ODE-TFV在加速条件下(高温、高湿)的稳定性,以及在强酸、强碱、强氧化剂和光照条件下的降解情况。研究结果显示,ODE-TFV在60℃高温、相对湿度90%及0.1mol稀盐酸、0.1mol稀NaOH条件下比较稳定,在浓盐酸(0.5mol以上)、浓NaOH(0.5mol以上)和氧化剂(H2O2)中有一定降解,降解方式主要为酯基的水解。ODE-TFV对光照不稳定,降解产物有待鉴定。论文两部分研究工作均取得明显进展和结果,格尔德霉素衍生物的综合评价研究结果提示,GM-AMPL、LD01和GM-GP等的抗病毒效果确切,但对Beagle犬的心脏毒性很强,具有较高的毒性风险。ODE-TFV的分析检测方法及质量研究结果,初步阐述了侯选化合物ODE-TFV的性质、对ODE-TFV主要有关物质及纯度检测中的关键技术进行了有益探索,为目标药物的进一步研发奠定良好基础。