大剂量照射后造血功能变化规律的研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zxhdbd
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目的:探索大剂量照射后造血功能的变化规律,寻找判断大剂量照射后造血损伤程度的分子生物学指标,探索急性放射病的诊断新指标和治疗新靶点。方法:观察不同剂量照射后C57BL/6J小鼠的生存率、外周血象、CFU-GM系集落培养、细胞周期和细胞凋亡的变化规律,小鼠骨髓组织部分造血生长因子与受体的表达规律,应用基因芯片技术筛选大剂量照射后小鼠骨髓组织的差异表达基因。结果:经生存率观察,选定了4个照射剂量组:6.5Gy、7.5Gy、8.5Gy和10Gy。发现以下指标存在一定的剂量相关性:外周血白细胞数最低值和血小板数降低发生时相;骨髓细胞照射后6小时的G2/M期阻滞细胞百分比和脾细胞照射后6小时S期阻滞细胞百分比;骨髓照射后12小时凋亡细胞百分比和脾脏与胸腺照射后6小时凋亡细胞百分比。应用RT-PCR技术从小鼠骨髓组织中扩增出干细胞因子(SCF)、粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)、促红细胞生成素受体(EPOR)、促血小板生成素受体(c-mp1)和干细胞因子受体(c-kit)的部分序列,并经测序证实。用RT-PCR与Southern杂交联用法初步探索了大剂量照射后部分造血生长因子与受体的表达规律,发现大剂量照射后早期,各基因的表达水平未见明显变化,随着照射后时间的延长,由于造血处于枯竭状态,不能得到足量的总RNA用于分析。经过两次基因芯片杂交,发现功能未知的新基因NM-025383与辐射相关,并从小鼠骨髓组织扩增出该基因。结论:从细胞水平上观察到的部分剂量相关性指标,对大剂量照射后造血损伤程度的判断有参考意义。从小鼠骨髓组织克隆出部分造血生长因子与受体的cDNA序列,为从整体水平上研究这些低拷贝基因在大剂量照射后的表达规律奠定了基础。RT-PCR与Southern杂交联用法研究基因表达水平具有较好的可行性。发现功能未知的新基因NM-025383与辐射相关,为此基因的存在提供了实验证据,为此基因的功能研究提供了线索。
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