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目的:利用原核表达的方法制备具有良好抗原性的腮腺炎病毒部分血细胞凝集素及神经氨酸酶(hemagglutinin and neuraminidase，HN)和核蛋白(nuclear protein,NP)，并建立特异性的腮腺炎病毒IgG抗体血清学检测方法。 方法:提取腮腺炎病毒RNA，RT-PCR法扩增截断的HN蛋白(HN-S)、NP蛋白全长，并连接至pET-32a(+)载体，构建重组表达质粒pET-32a(+)-HN-S、pET-32a(+)-NP，鉴定正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达，并用Western Blot方法进行鉴定。饱和硫酸铵沉淀粗提后经镍柱亲和层析纯化，获得高纯度的NP蛋白。包被纯化后NP抗原建立间接ELISA检测方法(NP ELISA法)，并检测了348份3周岁以内健康儿童血清中抗腮腺炎病毒IgG抗体水平，与维润腮腺炎病毒ELISA IgG抗体检测试剂盒(维润ELISA法)进行平行比较。 结果:本研究建立的NP ELISA法和维润ELISA法检测348份血清腮腺炎IgG抗体的阳性率分别为45.69%(159/348)和53.45%(186/348)、在<1.5岁组分别为0和3.45%(1/29)，1.5～2岁组分别为43.20%(73/169)和52.66%(89/169)，2～3岁组分别为57.33%(86/150)和64.00%(96/150)；2种方法总符合率为78.45%(273/348)、在<1.5周岁组符合率为96.55%(28/29)，1.5～2周岁组符合率为70.41%(119/169)，2～3周岁组符合率为84.00%(126/150)。与维润ELISA法相比NP ELISA法总灵敏性为72.58%(135/186)，在<1.5周岁组灵敏性为0(0/1)，1.5~2周岁组灵敏性为62.92%(56/89)，2～3周岁组灵敏性为82.29%（79/96）、总特异性为85.19%(138/162)，在<1.5周岁组特异性为100%(28/28)，1.5～2周岁组特异性为78.75%(63/80)，2～3周岁组特异性为87.04%(47/54)。 结论:利用原核表达的方法成功制备出具有腮腺炎抗原特性的HN-S抗原与NP抗原，并利用NP抗原建立了腮腺炎IgG抗体ELISA检测方法，为腮腺炎病毒人群血清流行病学调查奠定了基础，但需进一步使用中和试验评估NP ELISA法与维润ELISA法的灵敏性和特异性。