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第一部分钛颗粒诱导小鼠颅骨骨溶解模型的建立和评价目的：建立钛（Ti）颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解模型，模拟磨损颗粒诱导假体无菌性松动的病理过程。方法：7-8周龄健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为两组：（A）对照组；（B）Ti组。Ti组小鼠接受手术将无菌去内毒素的Ti颗粒5毫克植入小鼠颅骨骨面上诱导骨溶解；对照组小鼠接受相同的手术步骤，但将无菌生理盐水置于颅骨骨面作为对照。两周后所有小鼠过量麻醉处死，取颅骨标本做研究使用。以颅骨骨面冠、矢状缝交点为中心选中直径为5mm的圆形“感兴趣区域（ROI）”作为研究对象。苏木精伊红（H&E）染色法检测两组颅骨标本中骨溶解及炎性细胞浸润情况，Paint.NET软件测量骨膜厚度，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠颅骨ROI区域体外培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）的含量，实时定量逆转录-聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测TNF-α、IL-1β基因mRNA转录量。结果：实验过程中无动物死亡。颅骨标本大体观察见局部皮肤组织无红肿、渗液、皮疹及流脓等；Ti覆盖颅骨骨面粗糙，凹凸不平。H&E染色结果发现，Ti组小鼠颅骨骨面有明显的虫蚀样改变，骨膜内可见大量细胞浸润，炎性细胞居多，成纤维细胞较少。Paint.NET软件测量结果表明Ti组小鼠颅骨骨膜增厚为(0.30±0.03)mm，与对照组(0.06±0.01)mm比较，差异有统计学意义(p<0.05)。ELISA结果显示Ti组颅骨培养上清中TNF-α, IL-1β含量分别为(1440.12±82.33)ng/l和(872.13±42.39)ng/l，与对照组(235.01±35.41)ng/l和(140.02±21.07)ng/l比较，差异有统计学意义(p<0.05)。RT-PCR结果显示，经Ti刺激后，Ti组颅骨标本中TNF-α, IL-1β基因mRNA含量增多至7.31±0.40和9.62±0.85，与对照组（标准化为1）比较，差异有显著性意义(p<0.05)。结论：Ti颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解模型简单、可重复强，能较为准确的模拟关节假体无菌性松动的病理过程。第二部分淫羊藿苷对钛颗粒诱导骨溶解的影响目的：探讨淫羊藿苷（IC）对Ti颗粒诱导小鼠颅骨骨溶解的治疗作用及其机制。方法：7-8周龄健康雄性C57BL/6小鼠80只，随机分为四组：（A）对照组，（B）IC组，（C）Ti+安慰剂组，（D）Ti+IC组。C和D组Ti颗粒植入小鼠颅骨上建立骨溶解模型，A及B组小鼠仅接受相同的手术步骤，无Ti颗粒植入。建模当天B组和D组小鼠以IC（200毫克/千克/天）灌胃给药，A和C组以相同剂量安慰剂（PBS）治疗，两周后所有小鼠过量麻醉处死，取颅骨备用。利用micro-ct扫描不同处理组ROI区域，根据三维重建图像观察各组小鼠颅骨表面溶骨馅窝数量，CT自带软件定量计算颅骨标本ROI区域骨量（BV）,骨矿化密度（BMD）,骨表面积（BS）,骨表面积/骨量比率（BS/BV）；H&E染色法检测骨溶解及炎性细胞浸润情况，Paint.NET软件测量骨膜厚度；TRAP染色检测成熟破骨细胞；免疫组织化学染色检测RANKL和RANK的表达变化；ELISA检测颅骨培养上清中TNF-α，IL-1β的含量；QRT-PCR检测RANKL、 RANK、TNF-α和IL-1β基因mRNA表达变化。结果：1. Micro-CT三维重建图像显示对照组未放置Ti颗粒的小鼠颅骨表面光滑，未见明显的骨溶解迹象，而Ti+安慰剂组小鼠颅骨骨面蚀骨现象明显，骨溶解陷窝密布；相较于Ti+安慰剂组，Ti+IC组小鼠经IC口服治疗后溶骨现象得到遏制，蚀骨陷窝数量明显减少。Micro-CT3D分析定量检测：对照组中BV,BMD，BS，BS/BV值分别为(3.79±0.23)mm3,(0.71±0.05)mg/mm2，(35.71±1.98)mm2,(9.41±1.06)1/mm。Ti+安慰剂组中BV,BMD值降至(2.03±0.12)mm3,(0.58±0.03)mg/mm2,BS，BS/BV值增高至(45.73±3.84)mm2,(22.50±2.31)1/mm,与对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；经IC口服干预后,Ti+IC组中BV,BMD值增至(3.51±0.23)mm3,(0.69±0.04)mg/mm2,BS，BS/BV值降至(37.21±1.98)mm2,(10.57±1.29)1/mm，与Ti+安慰剂组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。2.H&E染色：对照组骨膜内细胞总量较少，成纤维细胞居多，炎性细胞较少，骨膜较薄；Ti+安慰剂组骨膜内可见大量细胞浸润，炎性细胞居多，成纤维细胞较少。Paint.NET软件测量结果表明对照组、IC组、Ti+安慰剂组、Ti+IC组颅骨骨膜厚度分别为(0.07±0.01)mm，(0.06±0.01)mm，(0.28±0.04)mm，(0.12±0.02) mm。Ti+安慰剂组与对照组相比差异有显著性意义(P <0.05)；Ti+IC组与Ti+安慰剂组相比差异有显著性意义(P <0.05)。3. TRAP染色结果显示，Ti+安慰剂组可见多个细胞胞浆呈紫红色、细胞核3个以上的TRAP阳性细胞，对照组和IC组阳性深染多核细胞较少；各组多核细胞计数显示：对照组（5.0±1.3）个，IC组未检出，Ti+安慰剂组（36.0±4.8）个，Ti+IC组（11.0±2.3）个，Ti+安慰剂组与对照组，Ti+IC组与Ti+安慰剂组相比较，差异有显著性意义（P<0.05）。IC显著减少Ti颗粒诱导的TRAP阳性细胞形成。4. ELISA检测结果显示：对照组上清中TNF-α和IL-1β蛋白浓度分别为（237.13±37.36）ng/l和（133.09±19.64）ng/l；Ti+安慰剂组中，二者浓度增长至（1447.52±78.23）ng/l和（889.14±45.94）ng/l，与对照组相比，差异有显著性意义（P<0.05）；Ti+IC组TNF-α和IL-1β浓度下降至（568.86±42.32）ng/l和（279.39±19.44）ng/l，与Ti+安慰剂组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。5.免疫组化染色显示：相较于对照组，Ti+安慰剂组中RANKL、RANK阳性深染位点分布密集，区域广泛，Ti+IC组中阳性深染位点分布稀疏，区域狭窄。这表明钛颗粒诱导RANKL、RANK蛋白表达上调，IC通过减少RANKL、RANK表达量抑制骨溶解。6.实时定量逆转录-聚合酶链反应(QRT-PCR)分析显示：设定对照组TNF-α和IL-1β mRNA表达量为1，IC组中二者表达量分别为0.81±0.13，0.83±0.12； Ti+安慰剂组为7.60±0.60；9.80±0.94；Ti+IC组为2.40±0.18；2.10±0.23；与对照组相比，Ti+安慰剂组中TNF-α和IL-1β mRNA表达量上调明显，差异有统计学意义（P<0.05）；经IC治疗后，Ti+IC组TNF-α和IL-1β基因转录量下调显著，差异有统计学意义（P<0.05）。这表明，淫羊藿苷对钛颗粒诱导骨溶解的抑制作用涉及TNF-α和IL-1β基因下调。Ti+安慰剂组中RANKL和RANK转录量分别为9.02±1.05，11.01±0.97,与对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。RANKL和RANK mRNA转录量在Ti颗粒刺激下明显上调。相反的，Ti+IC组中IC干预治疗后RANKL和RANK基因表达量显著减少为2.50±0.36，3.03±0.31，与Ti+安慰剂组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：IC显著抑制钛颗粒诱导的炎症反应，下调RANKL/RANK分子表达，抑制钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解，口服IC有可能成为预防和治疗假体周围骨溶解的有效方法。