纳米羟基磷灰石基因载体的表面修饰及其转染研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxh0532
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
纳米羟基磷灰石(HAP)作为基因载体有很多优良的特性,但是目前对纳米羟基磷灰石基因载体的应用还存在很多阻碍,目前关键的问题是提高纳米羟基磷灰石的分散稳定性及其携带基因、转染基因的能力。本实验分别采用聚乙烯亚胺(PEI)、六偏磷酸钠、牛血清蛋白、人血白蛋白作为分散剂,采用超声分散和机械搅拌法制备HAP胶体,并利用紫外分光光度计、红外光谱仪、纳米粒度及Zeta电位仪、电子显微镜等手段检测胶体性能,并研究了PEI修饰的不同形貌HAP的生物相容性、细胞毒性和基因转染效率的实验。得到以下主要结论:对HAP/PEI分散体系进行分析发现当PEI浓度为4‰时,体系具有较好的稳定性;适度的酸性环境有利于体系的稳定性。测试分析表明:PEI在HAP颗粒表面有吸附,PEI的正电荷和高分子链使得HAP颗粒因静电斥力与空间位阻共同作用而分散;TEM下观察发现改性后的纳米羟基磷灰石分散性得到明显改善。六偏磷酸钠对体系的分散稳定性有较好的效果。实验分析发现:当六偏磷酸钠的浓度为4%、pH为9.5时效果最好;吸附在颗粒表面的六偏磷酸钠为HAP颗粒提供了很高的电位,使得颗粒之间以静电斥力而分散;TEM分析结果显示改性后的纳米羟基磷灰石分散性显著提高。HAP/牛血清蛋白分散体系的检测发现:中性环境中,牛血清蛋白浓度为2.0mg/ml时分散体系的稳定性相对较好;电位与粒度测试说明牛血清蛋白对纳米羟基磷灰石胶体稳定性的改善是静电斥力与空间位阻共同作用;TEM分析结果表明表面吸附牛血清蛋白的纳米羟基磷灰石颗粒分散性得到一定增强。人血白蛋白与牛血清蛋白有较为相似的结果:人血白蛋白浓度为2.0mg/ml、pH=7.4时分散体系的稳定性最好;Zeta电位与粒度分析阐述了人血白蛋白浓度和体系pH值对HAP颗粒的影响趋势,红外光谱也显示纳米羟基磷灰石被人血白蛋白吸附修饰,TEM显示出了HAP颗粒较好的分散状态。经过PEI修饰后各种形貌的HAP均能高效地负载DNA,环境酸碱性的变化亦不会降低HAP对DNA的吸附性。在保护试验中发现:HAP基因载体能有效地保护DNA分子免受分解酶的干扰;较低浓度的PEI修饰剂和低浓度的载体对细胞的毒性不会产生太大的影响;本实验中制备的HAP能将目标基因有效地转染进Hela细胞和CNE-1细胞中,转染效率分别为20%和35%。
其他文献
情景教学是大学外语教学过程中最为有效的方法之一,最能激发学生学习外语的热情。情景教学实际上就是交际教学,情景为学生们创设特殊的交际环境,通过语言交流来提升学生的英语水
仿人机器人属于串联关节型机器人,其在运动过程中,随着关节角度的变化,各个关节电机的负载转矩和转动惯量可能发生变化。为了提高仿人机器人的运动控制性能,提高单个关节在变负载
高空飞行不只有娱乐试听设备功能可以体验,SNS社交网络或许会成为下一个帮助你在飞行中打发无聊时间的又一个利器。2月28日,荷兰皇家航空公司发布了“相遇&同坐”服务。这项服务使得荷航成为第一家把社交网络整合到航班预订流程中的航空公司。据悉,乘客可以把Facebook或LinkedIn的资料关联到航班预订流程中,便于他们知道谁和自己乘坐同一航班。  据荷航执行总监艾瑞克介绍,通过“相遇&同坐”服务,荷
超富集植物以其超强的重金属耐性和富集能力而成为近年来植物修复领域的研究热点,然而目前关于超富集植物对重金属的吸收累积特性及耐性机制仍须要进一步研究。为了解超富集
Stone&Webster公司两器两段再生技术在生产实践中存在着对原料的适应 差,第二再生器温度过高等问题。由洛阳石油化工工程公司的成套技术在镇海炼油化工股份有限公司炼油厂1.4Mt/a重油催化裂化装置
本文以16QAM为例,介绍了利用SystemView软件进行仿真分析的实验方法,通过具体实例阐述了仿真实验的过程,从中体现用SystemView仿真实验的特点.将SystemView可视化动态仿真应
以某催化裂化装置的吸收稳定系统为例,通过严格的全系统流程模拟,以总体经济效益为目标函数,分析了各塔塔板数对主要工艺参数和系统经济效益的影响。指出塔板数的确定必须和总体
摘 要:为了帮助学生感知逆向思维,帮助他们体验数学学习中的快乐,笔者结合苏教版小学数学的教材内容,希望通过在教材中设置逆向思维、从问题出发寻找解题思路、用质疑的眼光反思数学问题等途径,促使学生感受到数学学习的各种乐趣。  关键词:苏教版;逆向思维;快乐数学  逆向思维是一种与正向思维相对的思维方式,它打破传统的定式思维,让数学思维向对立面的方向发展,从数学问题的相反面进行深入探索,寻求解决问题的方
为探究高温-荷载耦合作用下废旧叠层轮胎隔震垫(STP)劣化损伤,选取几何尺寸为180 mm×180 mm×69 mm的6层STP,将其置于高温100℃、常温20℃,荷载4 MPa、5 MPa、6 MPa
中国古诗词艺术源远流长,它是一种音乐文学,既具有音乐性又具有文学性。其所具有的文化底蕴不仅在文学领域产生了巨大的影响,在音乐领域也具有不可替代的作用。随着历史的不