本文论述了男（雄）性生殖系统与加德纳氏菌感染的研究。 加德纳菌（Gardnerella vaginalis,Gv）是一类革兰染色阴性小杆菌或变异的球菌样小杆菌，厌氧，嗜血,培养困难。可寄生于人类的泌尿系统，Gv是女性细菌性阴道病（Bacterial vaginosis,BV）的主要病原菌之一，女性Gv感染不仅可以致BV，并可引起输卵管妊娠、胎膜早破和新生儿早产等不良妊娠结局。近年来研究表明，Gv可以经过性接触传播，与男性尿道感染和不育有关，并可引起脑炎、肾盂肾炎、肝脓疡、肺脓肿等。目前，对于Gv的致病机制及其导致不育的机理尚未阐明。临床上见到Gv的感染常伴随溶脲脲原体（Ureaplasma urealyticum,UU）的感染，据研究表明UU可以影响精子的发生并导致不育，有关Gv感染与不育及精子发生的关系还有待进一步体内、体外实验研究证实。 为此，本课题着重分两部分研究：（1）建立Gv感染SD雄性大鼠生殖系统模型，检测相关指标的改变；（2）研究Gv导致精子发生障碍，少精症的原理。 第一部分：Gv感染SD雄性大鼠生殖系统模型的建立。 从临床标本中分离出Gv，进行培养、传代，经过革兰染色、马尿酸实验、电镜观察等一系列方法进行鉴定。确定为Gv后，传代，刮取细菌，用Gv培养液稀释成浓度为108/ml的Gv菌液待用。取临床不育患者精液标本进行革兰染色，检测Gv。取性成熟的SD雄性大鼠18只，随机分成对照组和实验组两组，在无菌环境下，戊巴比妥腹腔注射麻醉后，打开腹腔，暴露膀胱，抽取尿液，实验组和对照组分别注射等量的Gv菌液和无菌培养基，关闭腹腔。大鼠取仰卧位，待其清醒后于无菌环境中养殖观察。在21d处死大鼠，称重，打开腹腔，观察内脏器官的形态改变情况，取出睾丸称重，部分睾丸组织立即放入Boiun’s液中固定，用于HE染色，光镜观察；部分睾丸组织置2％戊二醛中固定，常规电镜标本制备，半薄切片甲苯胺蓝染色，半定位，超薄切片电镜观察拍照，观察发现实验组大鼠睾丸支持细胞形态改变：细胞收缩，细胞间出现大的间隙，细胞膜不规则，细胞质内出现大量的空泡和髓样结构，脂滴明显增大，核收缩，核膜不规则。生精小管内生精细胞排列紊乱。另取部分组织划板培养。实验证实感染Gv的实验组大鼠睾丸相对重量较对照组减轻，HE染色光镜观察发现生精小管出现病理变化；取同侧附睾尾部组织放入PBS中进行精子上游试验，检测精子动力，发现实验组感染Gv的大鼠精子活动率明显降低。这组实验的意义在于: 有助于直接观察Gv对精子发生的影响；有利于观察Gv对生育能力的影响。总之，对于阐明Gv导致男性不育的机制及其泌尿生殖系统感染的关系具有重要的理论意义和临床意义。 第二部分：Gv感染诱导生殖细胞凋亡。 在建立Gv感染雄性大鼠模型的基础上，进行生殖细胞凋亡检测，分别取对照组动物睾丸组织及感染21d后的部分睾丸组织常规固定、包埋、切片后HE染色，光镜下观察凋亡细胞；部分睾丸组织做成匀浆用流式细胞仪做凋亡细胞的检测。结果显示：对照组动物睾丸的生精细胞凋亡发生率很低，21d的大鼠，光镜下典型凋亡的睾丸生精细胞明显多于对照组，可见生精上皮内许多生精细胞出现细胞核边聚或浓集，呈新月状或花瓣状，部分生精细胞凋亡严重，可见有大量的多核巨细胞，成群的生精细胞脱落进入生精小管管腔和附睾管管腔；电镜下：实验组大鼠睾丸生精细胞出现大量不同时期凋亡现象，染色质浓缩，多数附于核膜，附着区核孔消失，部分核发生碎裂，有的形成大囊泡，出现明显的发泡现象，有些细胞崩解成一系列大小不等的有质膜围绕的致密凋亡小体；支持细胞的形态学改变：细胞收缩、细胞间出现大的间隙，细胞膜不规则，细胞质内出现大量的空泡和髓样结构，胞质内脂滴明显增大，核收缩，核膜不规则。生精小管管腔生精细胞排列紊乱。流式细胞仪检测睾丸生精细胞有明显的凋亡峰，PI和Annexin-Ⅴ染色显示，异常细胞为凋亡而不是坏死，图像分析结果表明，与对照组动物相比较,亚二倍体细胞百分率、凋亡细胞的百分率都明显增高。