本课题来源于“十二五”南京市医学科技发展重大项目。益气固脱颗粒处方来源于南京市中医院临床有效验方,临床已经使用多年,由治疗子宫脱垂的经典古方补中益气汤和大补元煎化裁而来,本方由黄芪、当归、川断、山茱萸、升麻、枳壳、诃子、僵蚕等八味药组成,方药以补气健脾、益肾固脱之法,从根本上治疗脾肾两虚型子宫脱垂。脾肾两虚型子宫脱垂属于中医“阴挺”、“阴脱”范畴,中医学在阐述其病理机制时,从“脾虚失陷”、“肾虚失固”出发。患者因劳倦、多产,损伤脾肾而发本病。既要做到最大量地除去杂质或无效成分,保留有效成分,体现复方颗粒剂的综合疗效,又要使成品的质量安全有效、稳定可控,满足临床要求。本课题按照国家SFDA《药品注册管理办法》中药六类新药申报要求,在制剂原料、工艺、质量标准和稳定性方面进行研究。研究内容如下:制剂原料研究:按照《中国药典》2010年版一部有关规定,对制剂原料黄芪、当归、川断、山茱萸、枳壳、诃子、僵蚕、升麻的来源及品质进行鉴定,结果均符合要求,可用于益气固脱颗粒药学研究。制剂工艺研究:对处方药物进行分析,选出有效成分,根据各药物有效成分的理化性质,运用正交设计实验法分别对处方中醇溶性成分、水溶性成分进行了工艺优选,确定了最佳提取工艺。1.以黄芪甲苷、阿魏酸含量及醇提浸出物得率为考察指标,采用L9(34)正交试验对黄芪、当归、升麻、枳壳、诃子、川断六味药的醇提工艺条件进行了正交优选,确定最佳工艺条件为:加饮片总量10倍量70%乙醇,分三次回流提取,每次1.5小时。并进行醇提最佳工艺的验证。2.采用L9(34)正交试验以多糖含量、水提浸出物得率、马钱苷含量为指标,对山茱萸、僵蚕、醇提药渣等的水提工艺条件进行了正交优选,确定最佳工艺条件为:饮片浸泡0.5小时,加总量15倍量水,分两次煎煮,每次2小时。并进行水提最佳工艺的验证。3.采用水提醇沉法进行精制工艺研究,以多糖含量、水提浸出物得率、马钱苷含量为指标,分别采取不醇沉、40%乙醇醇沉、50%乙醇醇沉、60%乙醇醇沉的方法处理,结果为将水煎液浓缩至1.0 g生药/ml药液,加乙醇至含醇量达50%,放置48小时。4.在浓缩与干燥工艺的优选中,以黄芪甲苷及多糖含量为考察指标,确定浓缩、干燥工艺条件为:水煎液醇沉后的水醇液,回收乙醇,与醇提浓缩液合并,经减压浓缩至相对密度1.05～1.08(60℃),将醇沉后所得澄清液与醇提浓缩液合并,减压回收乙醇并浓缩成稠膏,在70℃减压干燥,得干浸膏粉并粉碎。5.对制剂成型工艺进行考察,确定成型工艺条件为浸膏粉:糊精:糖粉(10:0.8:0.2),以80%乙醇湿法制颗粒,50℃干燥,整粒,即得。质量标准研究:以中试放大制剂为样品对制剂进行了质量标准研究。以对照药材及相应的阴性制剂为对照,并建立了本制剂中黄芪、当归、山茱萸、枳壳、续断、诃子的薄层定性鉴别方法。按《中国药典》2010年版一部附录IC颗粒剂项下检查要求,对该制剂粒度、水分、溶化性、装量差异、微生物限度、重金属及砷盐进行相应的检查。采用高效液相色谱法测定制剂中黄芪甲苷、阿魏酸的含量,并做方法学考察。结果表明:所建立的黄芪、当归等饮片的TLC鉴别方法,专属性良好,阴性样品无干扰;颗粒剂检查均符合药典相关要求;相应成分在对应的线性范围之间与峰面积呈良好的线性关系,加样回收率及RSD均符合药品含量测定相关要求,制定初步质量标准草案。稳定性研究:按照《药品注册管理办法》及药典颗粒剂的要求,对三批中试样品进行了初步常温和加速(6个月)稳定性的研究,结果在考察期内,制剂质量稳定可控。稳定性研究还要继续以确定本制剂实际的有效期。研究结果表明该制剂的制备工艺合理、可行,质量标准可控,制剂质量稳定。本课题在中医药理论的指导下,根据饮片有效成分的性质、临床用药要求以及大生产实际,并灵活运用现代中药制剂技术及质量控制技术,较好地完成了本颗粒的药学研究,为本颗粒申报国家六类新药奠定了药学方面基础。