茉莉酸信号转导途径中新的组分的鉴定和特征

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茉莉酸是一种重要的植物激素,在调节植物生长发育和植物对昆虫咀食、机械损伤以及病原菌侵害等的抗性中发挥着重要作用。目前已克隆到的茉莉酸信号转导途径中的基因有COI1、JAR1、JIN1/MYC2以及CEV1。COI1是一种F-box蛋白,在调节植物抗性反应和植物育性中处于核心地位。茉莉酸的受体、COI1的底物和茉莉酸信号途径中的其他重要组分大多是未知的。我们利用根系伸长作为指标,通过筛选拟南芥EMS诱变的M2代群体,得到JA突变体。进一步分析发现,一些突变体对茉莉酸诱导的反应表现出各种变化,因此将这些突变体分为两种类型:JA不敏感突变体,JA超敏感突变体。通过对这些突变体进行遗传学和基因表达水平的分析发现它们确实表现出对茉莉酸反应的改变,并且是茉莉酸信号转导途径中的新组分。此外,我们还采用了化学遗传学方法来解析茉莉酸信号转导途径,以克服传统遗传学中由于基因功能冗余或突变致死所造成的研究瓶颈。Bestatin是一种氨肽酶的抑制剂,它能够强烈诱导番茄和拟南芥中茉莉酸信号途径所介导的抗性基因的表达,而且其作用是严格依赖于COI1的。和茉莉酸一样,bestatin也能抑制拟南芥主根的伸长。以此为基础,我们建立了大规模的遗传筛选系统。通过反向遗传学分析,我们从拟南芥中找到了一种与酵母中受bestatin抑制的氨肽酶Ⅰ的同源蛋白(aspartyl aminopeptidase 1, DAP1),并得到了它的T-DNA插入突变体。通过对其进行分子遗传学操作,我们认为DAP1作为一个新的组分在茉莉酸信号传导途径中发挥作用。期望通过对所分离得到的对JA敏感性降低的突变体以及dap1突变体的深入研究,分离得到茉莉酸信号传导中的更多的重要组分。
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