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第一部分HSV-1感染小胶质细胞后对Toll样受体的影响目的研究HSV-1感染小胶质细胞后Toll样受体表达情况。方法小胶质细胞系BV2细胞接种HSV-1制造细胞模型,使用实时荧光定量聚合酶链反应检测HSV-1感染组与对照组TLR2、TLR3、TLR9mRNA表达。结果病毒感染后,TLR2、TLR3、 TLR9mRNA均明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论TLR2、TLR3、TLR9参与了BV2小胶质细胞对HSV-1病毒的识别。第二部分HSV-1感染BV2细胞后对TLR2及下游通路信号分子的影响目的研究HSV-1感染小胶质细胞后对TLR2信号通路的影响。方法小胶质细胞系BV2接种HSV-1制造细胞模型,Malp2刺激BV2细胞作为阳性对照组,采用流式细胞术检测TLR2蛋白表达；Western blot检测TIRAP、MyD88、TRAF6、P38、 NEMO、NF-κBp65蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应检测TLR2、IRAP、MyD88、 TRAF6、P38、NEMO的mRNA表达；ELISA检测IL-6、TNF-α的表达。结果1、BV2细胞被Malp2刺激后,TLR2及下游信号通路因子表达均明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。2、HSV-1感染BV2细胞后,TLR2及下游信号通路因子表达明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论TLR2及下游信号通路因子介导了HSV-1感染BV2细胞的免疫炎性反应。第三部分柯里拉京对HSV-1感染后BV2细胞TLR2通路的调节作用实验1柯里拉京对HSV-1感染正常BV2细胞TLR2通路的调节作用目的研究柯里拉京对HSV-1感染后BV2细胞TLR2通路的调节作用。方法小胶质细胞系BV2接种HSV-1制造细胞模型,Malp2刺激BV2细胞作为阳性对照组,细胞受HSV-1和Malp2干预后柯里拉京治疗24h,采用流式细胞术检测TLR2蛋白表达；Western blot检测TIRAP、MyD88、TRAF6、P38、NEMO、NF-κBp65蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应检测TLR2、TIRAP、MyD88、TRAF6、P38、 NEMO的mRNA表达；ELISA检测IL-6、TNF-α的表达。结果1、柯里拉京治疗受Malp2刺激的BV2细胞后,TLR2及下游信号通路分子表达均下降,与生理盐水治疗组比较(P<0.05)。2、柯里拉京治疗受HSV-1感染的BV2细胞后,TLR2及下游信号通路分子表达均下降,与生理盐水治疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论柯里拉京可以抑制HSV-1感染BV2细胞后激活的TLR2信号通路。实验2柯里拉京抑制HSV-1感染后BV2细胞TLR2通路机制研究目的研究柯里拉京抑制HSV-1感染后BV2细胞TLR2通路的机制。方法通过慢病毒载体使BV2细胞TLR2过表达,HSV-1感染BV2细胞后柯里拉京治疗24h；通过小分子RNA使BV2细胞TLR2表达沉默,HSV-1感染BV2细胞后柯里拉京治疗24h结果,采用Western blot、Real-time PCR和ELISA检测TLR2下游信号通路分子表达情况。结果1、TLR2过表达时,柯里拉京治疗受HSV-1感染的BV2细胞后,与生理盐水治疗组比较,TLR2下游信号通路分子表达均下降(P<0.05)。2、TLR2表达沉默时,柯里拉京治疗受HSV-1感染的BV2细胞后,与生理盐水治疗组比较：TTRAP变化不明显(P>0.05); MyD88、TRAF6表达上升(P<0.05); P38、NEMO、NF-κBp65、IL-6、TNF-α表达下降(P<0.05)。结论柯里拉京对TIRAP、MyD88、TRAF6的抑制作用需要TLR2的参与,同时柯里拉京可能通过其他的Toll样受体或者直接对P38、NEMO, NF-κBp65、IL-6、TNF-α产生抑制作用。第四部分柯里拉京对单纯疱疹病毒性脑炎小鼠TLR2通路的影响目的研究柯里拉京通过抑制TLR2通路治疗单纯疱疹病毒性脑炎的可行性。方法Balb/c、鼠颅内注射HSV-1制造小鼠单纯疱疹病毒性脑炎模型,随机分成：正常组、柯里拉京组、Malp2+盐水治疗组、Malp2+柯里拉京治疗组、HSV-1+盐水治疗感染组、HSV-1+柯里拉京治疗组。采用HE染色观察脑组织形态学；免疫组化检测TLR2表达；实时荧光定量聚合酶链反应检测TLR2、TIRAP、MyD88、TRAF6、 P38、NEMO的mRNA表达；Western blot检测TIRAP、MyD88、TRAF6、P38、NEMO、 NF-κBp65蛋白表达；ELISA检测IL-6、TNF-α的表达。结果1、柯里拉京干预组小鼠脑组织病理改变减轻2、Malp2+盐水治疗组和HSV-1+盐水治疗感染组与正常组比较,TLR2及下游信号通路因子表达明显升高(P<0.05)。3、柯里拉京治疗受Malp2刺激的小鼠后,与生理盐水治疗组比较,TLR2及下游信号通路分子表达均下降(P<0.05)。4、柯里拉京治疗受HSV-1感染的小鼠后,与生理盐水治疗组比较,TLR2及下游信号通路分子表达均下降(P<0.05)。结论柯里拉京可以通过抑制TLR2通路减轻HSV-1感染激发的脑损伤。