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植物源保鲜剂,因其没有化学抑菌剂所带来的环境污染、农药残留及抗药性等问题,已成为国内外天然防腐保鲜剂开发研究的方向和热点。但由于其天然产物价格居高不下,造成使用成本较高,尤其是附加值较低的农产品很难推广使用。番茄果实营养丰富,但属于果皮薄且多汁的品种,采后贮藏过程当中容易受机械损伤、微生物感染等发生腐烂,采后损失率极高。因此,如何减少植物源保鲜剂在番茄等生鲜果蔬中的使用量,降低其使用成本是一个亟待解决的问题。本研究选取11种已报道具有抑菌活性的植物源保鲜剂,针对果蔬采后两种常见的腐败真菌,同时也是番茄采后主要的腐败菌,腐皮镰孢菌（Fusarium solani CICC 2603=ATCC 36031,以下简写F.solani）和匍枝根霉（Rhizopus stolonifer ATCC 12939,以下简写R.stolonifer）,进行抗菌活性研究。根据最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）,按照棋盘法对11种植物源抑菌剂进行复配,发现对F.solani和R.stolonifer均有协同抑菌作用的组合仅有1组,即百里酚和水杨酸(记为STSA),其在协同抑菌作用中的MIC值比单独使用两种抑菌剂时的MIC值降低了74.62%87.69%,有效降低了单个活性成分的作用浓度。通过对F.solani和R.stolonifer的菌丝和细胞形态的观察,发现STSA作用后细胞结构和形态发生严重变化,菌丝体表面出现一些隆起,显示出不规则的收缩,出现皱褶;细胞壁变薄,细胞质基质减少,大量空泡在细胞质中融合,形成较大的空泡。同时,STSA、百里酚和水杨酸均对F.solani和R.stolonifer的细胞膜的结构和功能都造成了不同程度的损伤。对两种真菌进行碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色后观察发现,随着STSA、百里酚和水杨酸作用浓度的增加,两种真菌中被染色的细胞比例均有所增加,并且呈浓度依赖性（r值均在0.91以上）,表明F.solani和R.stolonifer的细胞膜完整性被破坏,使得PI可以穿过细胞膜与核酸结合显示红色荧光。水杨酸在STSA对F.solani细胞膜完整性损伤的协同作用中占主要地位;百里酚和水杨酸在STSA对R.stolonifer细胞膜完整性损伤的协同作用中贡献度相当。随着抑菌进程,两种真菌细胞在260 nm和280 nm处的泄漏量均有所增加,各组在1 h?24 h的作用时间之间具有显著差异（P（27）0.05）,增加比例最高分别达79.52%和82.65%,表明抑菌剂造成两种真菌细胞内的核酸和蛋白质的泄漏量增加。且百里酚和水杨酸在浓度为0.5和1 MIC的STSA对F.solani和R.stolonifer细胞内核酸泄露的协同作用中贡献度相当,但百里酚在浓度为2MIC的STSA对F.solani细胞内核酸泄露的协同作用中起主要作用,水杨酸在STSA对于R.stolonifer细胞内蛋白质泄露的协同作用中起主要作用。同时,F.solani和R.stolonifer细胞膜中麦角固醇的含量随着抑菌剂浓度的增加而降低,并呈现浓度依赖性（r值在-0.8211和-0.8975之间）,且百里酚和水杨酸在STSA分别对两种菌麦角固醇含量的影响的贡献度相当。STSA通过阻碍细胞膜中麦角固醇的合成,破坏了两种真菌的细胞膜的正常功能,并最终抑制F.solani和R.stolonifer的生长。此外,STSA、百里酚和水杨酸分别对F.solani和R.stolonifer的线粒体的结构和功能产生严重影响。三种抑菌剂分别作用F.solani和R.stolonifer后,两种真菌的线粒体膜电位均显著升高,表现为膜电势超级化,且呈现浓度依赖性（r值在0.9244到0.9972之间）,表明两种真菌的线粒体膜结构被改变。且相同浓度抑菌剂处理后,F.solani线粒体膜电位均高于R.stolonifer,说明F.solani的线粒体膜电位所受影响更大。研究抑菌剂对三羧酸（TCA）循环的关键酶活性的影响发现,柠檬酸合成酶（CS）、异柠檬酸脱氢酶（IDH）、α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）和苹果酸脱氢酶（MDH）的活性均受到抑菌剂不同程度的抑制,酶活性下降率在71.45%到98.38%之间。同时,抑菌剂导致F.solani和R.stolonifer细胞内TCA循环中的柠檬酸（CA）含量分别下降65.64%（F.solani）和90.80%（R.stolonifer）,表明抑菌剂严重影响了TCA循环的正常进行,进而损伤了两种真菌的线粒体功能。此外,两种真菌经抑菌剂处理后发现,其细胞内活性氧（ROS）的积累有明显增加,增长率最大值分别为86.71%（F.solani）和97.78%（R.stolonifer）;并且,丙二醛（MDA）大量生成,增长率最大值分别为73.54%（F.solani）和80.00%（R.stolonifer）。综上所述,STSA导致F.solani和R.stolonifer细胞膜损伤,致使其细胞内容物（核酸和蛋白质）的大量泄漏,麦角固醇合成严重受阻,线粒体膜发生了电势超级化改变了线粒体的膜结构,TCA循环中关键酶活性降低,进而影响了ATP合成和NADH产生,破坏TCA循环,ROS和MDA的大量累积进一步造成线粒体功能障碍和细胞氧化损伤,细胞的过氧化继续影响细胞内线粒体内关键酶的活性,加剧膜的损伤,最终将导致F.solani和R.stolonifer细胞死亡。STSA对F.solani和R.stolonifer的体外抑菌作用表明,STSA对两种腐败真菌的菌丝生长抑制率均达到100%,对其孢子萌发抑制率达到96%以上;番茄接菌试验结果表明,STSA对F.solani的抑菌效果优于R.stolonifer;对番茄伤口接种F.solani的保护作用优于治疗作用,对伤口接种R.stolonifer的番茄的保护作用和治疗作用的差异不显著;结合感官评价,浓度为1 MIC的STSA对好果的保鲜效果更好,2 MIC的STSA更适用于有腐烂情况发生的番茄保鲜;进一步将不同浓度的STSA加入到可食性虫胶中,制成涂膜液,覆盖于番茄表面。研究发现,STSA虫胶涂膜和对照组相比,其透湿性和透氧性均显著降低（P（27）0.05）,在一定程度上阻隔了番茄果实内部的水分散失和气体交换;浓度为5 MIC的STSA虫胶涂膜番茄在贮藏期间,腐烂率与失重率最低（P（27）0.05）,番茄的可溶性固形物含量下降最慢,采后感官品质维持最好,不同浓度的STSA虫胶涂膜对番茄采后的颜色没有影响;对番茄硬度损失具有较好抑制作用的浓度为1MIC和5MIC STSA,能将可滴定酸含量维持在较高的水平的浓度为10 MIC,延迟总酚峰值出现的有效浓度是1 MIC,有利于番茄风味的保存;对降低贮藏期间番茄体内MDA累积的有效浓度是5 MIC,有效防止了果实衰老和膜损伤,诱导番茄体内两种抗病性相关酶（多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶）活性在短时间内升高,提高果实的免疫力,提高果实采后抵抗病原真菌侵染的能力,从而减少采后贮运过程中的损失。本课题的研究结果将拓展植物活性成分的应用前景,为番茄采后保鲜提供基础数据和科学的理论依据,并为果蔬采后贮藏及运输提供借鉴作用。