基因工程人白细胞介素6发酵中试工艺研究

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该文系统地研究了重组人白细胞介素6工程菌发酵的中试工艺条件,得到了两种培养方式下的最优条件,并给出了初步解决菌体浓度和异源蛋白质含量相互矛盾的方法.间歇发酵中,以2×YT作为培养基,接种量为2%,pH在7.0左右,诱导前溶氧水平在20%,温度在30℃,当OD<,600>达到1.6迅速升温到42℃诱导,控制溶液氧水平在10%,当溶氧水平开始上升且速度加快时,结束发酵.流加发酵中,首先确定了初始培养基和流加培养基的组成,仿指数阶跃流加,控制溶氧水平为10%,30℃下培养到OD<,600>为9.4左右,然后升温诱导,控制溶氧水平7%-10%,以溶氧水平开始上升作为结束标志,整个过程控制pH在6.9左右.诱导后适当的降低温度能在短时间内提高源蛋白质的百分含量,同时磷酸盐对于提高表达量了有极其重要的作用.发酵过程中控制菌体的比生长速率约为 0.15h<-1>时能实现高菌体浓度和高表达量的统一和提高目的蛋白质收率.
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