血小板源性生长因子与子宫肌瘤细胞增殖相关性研究

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目的检测子宫肌瘤患者血小板源性生长因子(Platelet-Derived Growth Factor,PDGF)及其受体PDGFR-α和PDGFR-β在肌瘤组织及其病变周围正常平滑肌组织中的表达,比较在月经周期不同时期它们表达的差异;研究PDGF对原代培养的子宫肌瘤细胞和肌瘤周围正常平滑肌细胞增殖的影响以及对胶原蛋白表达的影响;探讨PDGF在子宫肌瘤的发生发展中的作用,为从新的角度寻找治疗和预防子宫肌瘤的途径提供理论基础.方法1、收集21例因子宫肌瘤而行子宫切除术的手术标本,采用免疫组织化学链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物法(SABC法)分别测定肌瘤组织及邻近肌层组织中PDGF-A,PDGF-B、PDGFR-α和PDGFR-β的表达情况,通过计算机彩色图文摄像分析系统分析其抗原表达的平均光密度.2、用基因重组人PDGF-AB(10ng/ml)作用于原代培养的子宫肌瘤细胞,以邻近正常子宫肌层细胞作对照,用RT-PCR法从mRNA水平检测在有无PDGF-AB作用下,细胞增殖性核抗原(PCNA),前胶原α1多肽(Ⅰ、Ⅲ)表达的差异.3、将原代培养的子宫肌瘤细胞和邻近正常子宫肌层细胞做细胞爬片,免疫组织化学法从蛋白质水平检测PDGF-AB(10ng/ml)干预下,PCNA的表达情况,通过计算机图片摄像分析系统统计分析其抗原表达的平均光密度的差异.结论PDGF及其受体在子宫肌瘤组织中局部的高表达可能与子宫肌瘤平滑肌细胞的高增殖状态有关;PDGF-BB的表达受月经周期影响,可能做为主要因子参与到卵巢激素刺激的子宫肌瘤平滑肌细胞的增殖中,而PDGFR-α则做为主要的受体类型介导PDGF在子宫肌瘤发生、发展中的效应.PDGF在体外对子宫肌瘤和子宫平滑肌细胞均有促进增殖的作用,但子宫肌瘤细胞对PDGF作用的敏感性要显著高于子宫平滑肌细胞.PDGF作用下子宫肌瘤细胞外基质的分泌也增加,推测其在体内通过同时促进子宫肌瘤细胞的增殖和细胞外基质分泌的增加而促进肌瘤组织的生长.
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