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目的：探讨CtBP2在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的表达状况,并确定其与临床病理特征及患者预后的关系。再运用短发卡RNA (shRNA)干扰技术沉默前列腺癌细胞中的CtBP2基因,建立稳定转染细胞株。进一步研究靶向沉默CtBP2后细胞增殖能力的变化。方法：1.应用免疫组织化学法(SABC法)检测CtBP2在160例前列腺癌组织和60例良性前列腺增生组织中的表达情况,并与Gleason评分、临床分期等临床病理特征进行统计学分析。结合免疫组化研究结果及患者临床随诊资料,对它们之间的关系进行Kaplan-Meier生存分析及多变量Cox回归分析。2.利用qPCR和Western-blot筛选出CtBP2表达水平最高的前列腺癌细胞系作为研究对象。经脂质体介导分别将三个针对不同位点的CtBP2-shRNA表达载体转染入CtBP2表达最高的前列腺癌细胞系中,通过RT-PCR及Western印迹法筛选出干扰效果最佳的质粒。3.经嘌呤霉素筛选及克隆化培养后获得稳定转染CtBP2-shRNA的细胞株。应用qPCR和Western印迹法分别检测转染前后细胞中CtBP2在mRNA以及蛋白水平的表达情况。4.运用细胞计数法、细胞克隆形成实验及MTT法检测稳定转染CtBP2-shRNA真核表达载体前后前列腺癌细胞的增殖能力。结果：1.通过免疫组化分析发现,在前列腺癌组织中CtBP2蛋白高表达率为86%(138/160),表达水平较良性前列腺增生组织显著升高(P<0.05)；CtBP2的表达与肿瘤临床分期(P=0.025)、Gleason评分(P=0.019)及PSA水平(P=0.018)密切相关。通过Kaplan-Meier生存分析发现CtBP2的表达水平与前列腺癌患者生存时间显著负相关(P=0.027)。多变量Cox回归分析显示CtBP2表达水平是患者预后的独立预测因子(P=0.043)。2.采用qPCR和Western blot方法检测了正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)、 PC3、LNCaP3个细胞系中CtBP2的表达水平,结果显示其表达水平高低顺序依次为RWPE-1<LNCaP<PC3.将CtBP2-shRNA表达载体成功转染入PC3细胞,靶向838-857位点干扰质粒1(CtBP2-shRNA-1)比干扰质粒2和3具有更强的CtBP2基因沉默效应(P<0.05)。成功建立稳定表达CtBP2-shRNA-1的PC3细胞系。稳定转染后PC3细胞中CtBP2在mRNA以及蛋白水平的表达较转染前明显降低(P<0.05)。3.(1)细胞计数及MTT实验结果表明Silence组(稳定转染CtBP2-shRNA-1真核表达载体的PC3细胞)与Vector组(稳定转染空质粒PC3细胞)、Blank control组(正常PC3细胞)相比较,其增殖水平于培养第2天开始有统计学差异,实验组细胞增殖水平降低(P<0.05)。(2)细胞克隆形成实验结果显示Blank Control组、Vector组和Silence组PC3细胞培养12天后可见克隆数分别为136±11、128±12和56±9,Silence组细胞克隆形成直径明显小于其他两组,Silence组PC3细胞的集落形成抑制率达到了59.8%。结论：前列腺癌组织中CtBP2高表达,并与前列腺癌的高Gleason评分、高临床分期、高PSA水平以及患者不良预后密切相关。靶向CtBP2mRNA838-857位点的干扰质粒能够有效的在转录后水平抑制前列腺癌细胞CtBP2基因的表达,并使前列腺癌细胞增殖能力明显下降。这些实验结果表明CtBP2表达增加与前列腺癌恶性生物学行为相关,是前列腺癌发生进展和不良预后的一个可供参考的预测指标。