内源性神经激肽和降钙素基因相关肽对缺血后适应的保护作用

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songchanglei
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目的:观察感觉神经肽(内源性神经激肽和降钙素基因相关肽)在缺血后适应中的作用。方法:实验选用SD350g-400g雄性大鼠随机分为六组:sham组(假手术组)心脏冠脉分支只穿线不结扎;I/R组(缺血再灌注组)结扎冠脉分支缺血30min以后再灌注2h组;ipost组(缺血后适应组)结扎冠脉分支缺血30min以后行再灌注10s,夹闭10s,再灌注和夹闭各反复3次然后行再灌注2h;CGRP8-37+ipost组(给药CGRP8-37缺血后适应组)给予CGRP受体拮抗剂CGRP8-37并缺血后适应组;D-SP+ipost组(给药D-SP缺血后适应组)给予P物质受体拮抗剂D-SP并缺血后适应组;CGRP8-37+D-SP+ipost组(给药CGRP8-37+D-SP缺血后适应组)联合给予P物质受体拮抗剂D-SP和CGRP受体拮抗剂CGRP8-37并缺血后适应组。采用心电监测、酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术观察缺血后适应中感觉神经肽对心律、氧自由基系统等的影响。结果:1.缺血后适应中感觉神经肽(内源性神经激肽和降钙素基因相关肽)的表达1.1缺血后适应中P物质的表达:本实验分三组:sham组、I/R组、ipost组,I/R组较sham组P物质表达上升(n=8,P>0.05);ipost较I/R组P物质表达上升(n=8,P>0.05)。P物质在缺血后适应心肌组织中的表达有上升趋势,但组间差异无统计学意义。1.2缺血后适应中CGRP的表达:本实验分三组:sham组、I/R组、ipost组,I/R组较sham组CGRP表达明显上升(n=8,P<0.01);ipost较I/R组CGRP表达明显上升(n=8,P<0.01)。CGRP在缺血后适应心肌组织中的表达显著上升,组间差异有统计学意义。2.感觉神经肽对缺血后适应室性心律失常及心脏血流动力功能的影响2.1感觉神经肽对缺血后适应室性早搏的影响:本实验分六组(n=12):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组室早发生增多(P<0.01);ipost组较I/R组室早发生减少(P<0.01); CGRP8-37+ipost组较ipost组室早发生增多(P<0.01);D-SP+ipost组较ipost组室早发生增多(P<0.01);CGRP8-37+D-SP+ipost组较CGRP8-37+ipost组室早发生增多(P>0.05);CGRP8-37+D-SP+ipost组较D-SP+ip ost组室早发生增多(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组室早发生增多(P<0.01)。2.2感觉神经肽对缺血后适应室性联律、室速、室颤发生率的影响:本实验分六组(n=12):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组。联律发生率各组结果为:sham组(0.00%)、I/R组(100.00%)、ipost组(66.67%)、CGRP8-37+ipost组(91.67%)、D-SP+ipost组(91.67%)、CGRP8-37+D-SP+ipost组(100.00%);室速室颤发生率各组结果为:s ham组(0.00%)、I/R组(92.00%)、ipost组(0.00%)、CGRP8-37+ipost组(0.00%)、D-SP+ipost组(0.00%)、CGRP8-37+D-SP+ipost组(8.00%)。2.3感觉神经肽对缺血后适应心脏血流动力功能的影响:本实验分六组(n=12):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、]D-SP+ipo st组、CGRP8-37+D-SP+ipost组。各组对收缩压、舒张压、平均压、脉压差、心率的影响均无统计学差异。3.感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中氧自由基清除剂及氧自由基表达的影响:3.1感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中SOD(超氧化物歧化酶)的影响:本实验分六组(n=6):sham组、I/R组、ipost组CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组SOD表达升高(P<0.05);ipost组较I/R组SOD表达升高(P>0.05);CGRP8-37+ipost组较ipost组SOD表达降低(P<0.01); D-SP+ipost组较ipost组SOD表达降低(P<0.01);CGRP8-37+D-SP+ipost组较CGRP8-37+ipost组SOD表达降低(P>0.05);CGRPe-37+D-SP+ipost组较D-SP+ipost组SOD表达降低(P<0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组SOD表达降低(P<0.01)。3.2感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中GSH(还原性谷胱甘肽)的影响:本实验分六组(n=6):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组GSH表达升高(P<0.05);ipost组较I/R组GSH表达降低(P>0.05); CGRP8-37+ipost组较ipost组GSH表达升高(P<0.05);D-SP+ipost组较ipost组GSH表达升高(P>0.05); CGRP8-37+D-S P+ipost组较CGRP8-37+ipost组GSH表达降低(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较D-SP+ipost组GSH表达升高(P>0.05);CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组GSH表达升高(P>0.05)。3.3感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中MDA(丙二醛)的影响:本实验分六组(n=6):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组MDA表达升高(P>0.05);ipost组较I/R组MDA表达升高(P>0.05); CGRP8-37+ipost组较ipost组MDA表达升高(P>0.05); D-SP+ipost组较ipost组MDA表达降低(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较CGRP8-37+ipost组MDA表达降低(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较D-SP+ipost组MDA表达升高(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组MDA表达升高(P>0.05)。4.感觉神经肽对缺血后适应心肌组织凋亡的影响4.1感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中Caspase-3表达的影响:本实验分六组(n=6):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组Caspase-3表达明显升高(P<0.01);ipost组较I/R组Caspase-3表达明显降低(P<0.01);CGRP8-37+ipost组较ipost组Caspase-3表达升高(P>0.05);D-SP+ipost组较ipost组Caspase-3表达升高(P>0.05);CGRP8-3-+D-SP+ipost组较CGRP8-37+ipost组Caspase-3表达升高(P>0.05); CGRP8-37+D-SP+ipost组较D-SP+ipost组Caspase-3表达升高(P>0.05);CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组Caspase-3表达升高(P>0.05)。5.感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中CRYAB表达的影响5.1感觉神经肽对缺血后适应心肌组织中CRYAB表达的影响:本实验分六组(n=6):sham组、I/R组、ipost组、CGRP8-37+ipost组、D-SP+ipost组、CGRP8-37+D-SP+ipost组,I/R组较sham组CRYAB表达降低(P>0.05);ipost组较I/R组CRYAB表达升高(P>0.05);CGRP8-37+ipost组较ipost组CRYAB表达升高(P>0.05);D-SP+ipost组较ipost组CRYAB表达降低(P>0.05);CGRP8-37+D-S P+ipost组较CGRP8-37+ipost组CRYAB表达降低(P>0.05);CGRP8-37+D-SP+ipost组较D-SP+ipost组CRYAB表达升高(P>0.05);CGRP8-37+D-SP+ipost组较ipost组CRYAB表达降低(P>0.05)。结论:1.感觉神经肽(P物质和CGRP)在缺血后适应心肌组织表达有升高现象,提示感觉神经肽(P物质和CGRP)可能参与了缺血后适应的心肌保护作用。2.缺血后适应有降低室性心律失常发生的现象,拮抗感觉神经肽受体有增加缺血后适应室性心律失常发生的现象,提示感觉内源性神经肽可能参与了缺血后适应对室性心律失常发生的影响作用。3.尚未发现拮抗感觉神经肽(P物质和CGRP)受体对缺血后适应的血流动力学影响,尚不能证明感觉神经肽(P物质和CGRP)参与了缺血后适应对血流动力学的作用。4.缺血后适应心肌SOD表达有上升趋势,拮抗感觉神经肽以后缺血后适应心肌SOD表达下降,提示缺血后适应可能通过刺激感觉神经肽上调SOD对心肌起保护作用5.本实验对心肌凋亡Casiase-3的表达研究发现缺血后适应有减少心肌凋亡发生的现象,拮抗感觉神经肽以后缺血后适应心肌凋亡有增高现象,提示感觉神经肽可能通过减少心肌凋亡而参与了缺血后适应的心肌保护作用。6.本实验尚未发现缺血后适应中感觉神经肽对CRYAB表达的影响。
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