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目的：观察肿瘤坏死因子(TNF-α,10ng/mL)对胰岛微血管内皮细胞(MS-1)的形态、增殖,以及表面粘附因子(ICAM-1, VCAM-1, E-选择素)表达的影响。方法：通过显微镜观察MS-1细胞形态,MTT法观察细胞增殖情况,以及流式技术检测表面粘附因子ICAM-1, VCAM-1,和E-选择素的表达。结果：1.与对照组相比,肿瘤坏死因子(TNF-α)孵育MS-1细胞4h未见明显形态学改变,孵育24h和48h后,可见MS-1细胞逐渐变为长梭形,贴壁能力减弱,细胞结构排列紊乱,说明TNF-α本身能影响细胞形态,损伤其生长状态。2.MTT实验显示TNF-α孵育MS-1细胞4h无明显异常,孵育24h和48h均能损伤MS-1细胞增殖能力,具有时间依赖性。3.与对照组相比,TNF-α孵育4h能激活MS-1细胞表达ICAM-1,VCAM-1, E-选择素,孵育24h时仍能激活ICAM-1,VCAM-1的表达。结论：TNF-α能导致MS-1细胞形态学改变,损伤其生长状态,降低其增殖能力,促进内皮细胞表面粘附因子的表达,引起胰岛微循环炎症环境,进而损伤胰岛功能。2型糖尿病;type2diabetes mellitus, T2DM)的众多并发症中,大血管的并发症是患者致死致残的主要原因之一,相比非糖尿病患者,T2DM患者心血管疾病的发生率增加2-4倍,且血管损害的程度也大为增加。大血管病变往往在诊断糖尿病的前十余年就开始增加,诊断时大概有40%—50%的人合并了血管的动脉粥样硬化。糖尿病患者一级亲属(first degree relatives, FDRs)包括糖耐量正常者是T2DM的高危人群。众多研究认为FDRs人群已存在血管内皮细胞活化及内皮功能紊乱,并可能成为其发生胰岛素抵抗(insulin resistence,IR)的主要原因之一。因此,研究T2DM高危人群早期血管内皮功能及影响因素有重要的意义。针对这一问题我们做了如下四个部分的研究。所有部分的研究人群为随机选90例2型糖尿病患者作为糖尿病组；100例上述患者正常糖耐量一级亲属作为观察组；年龄、性别和体重指数匹配；无糖尿病家族史的90例健康志愿者作为对照组。第一部分：抗氧化应激在2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属早期血管功能变化中的作用。方法：观察糖尿病组、观察组、对照组的抗氧化能力：超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOS)、终末糖基化产物(sRAGE)及游离脂肪酸(FFA)、血糖、血脂、胰岛细胞功能的改变。结果：观察组与对照组相比,观察组NO、SOD、sRAGE有降低趋势(P>0.05),T-AOS无明显改变,P30minPG、TG、Homa-IR显著升高(P<0.05)；P30minINS、Homa-IS显著降低(P<0.05),FPG、P2hPG、P2hINS、GHbA1c无明显差异(P>0.05)。结论：糖尿病组抗氧化能力显著降低、胰岛素抵抗增加及胰岛p细胞功能缺陷。观察组抗氧化能力有降低趋势并且已存在早期糖代谢及脂代谢紊乱、胰岛素抵抗及p细胞功能受损。第二部分：炎症在2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属早期血管功能变化中的作用。方法：观察对照组与观察组对象的体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、空腹血糖(FPG)、胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、CRP、IL-23, TNF-α,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果：观察组CRP、IL-23、TNF-α较对照组明显升高(P<0.05),且IL-23与HOMA-IR (r=0.412, P=0.001)、TNF-α显著相关(r=0.458,P=0.000)。结论：CRP、IL-23浓度在2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属中即有升高,与HOMA-IR显著相关,是2型糖尿病患者及其糖耐量正常一级亲属介导胰岛素抵抗及炎症过程的重要细胞因子。第三部分：纤溶系统在2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属早期血管功能变化中的作用。方法：分别检测血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、纤维蛋白元(Fbg)及血脂、BMI、血浆空腹胰岛素(FINS)、GHbA1c、和CRP等指标。结果：观察组t-PA含量下降(P<0.05),Fbg、PAI-1含量升高(P<0.05)。结论：2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属存在高凝状态,而且凝血、纤溶功能异常参与了其早期血管功能的改变。第四部分：结合超声和血清中非对称性二甲基精氨酸(symmetric dimethylarginine, ADMA)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、瘦素(leptin, LEP)水平分析2型糖尿病正常糖耐量一级亲属早期血管内皮功能的改变。方法：测定2型糖尿病患者糖耐量正常一级亲属的血清ADMA,, ET-1)与LEP的水平,利用超声技术测定肱动脉内皮依赖性舒张功能(flow mediated dilatation, FMD)和颈动脉粥样硬化参数(Ep、β、AC)。结果：相对对照组,观察组血清ADMA、ET-1、LEP、明显升高(P<0.05)；颈动脉Ep、β显著升高(P<0.01), FMD显著降低(P<0.05),AC有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);IMT变化不明显。Ep和β分别与血清ADMA、 ET-1、LEP呈正相关,AC和FMD分别与血清ADMA、ET-1、LEP呈负相关(P均<0.05)。结论：T2DM糖耐量正常FDRs存在内皮功能紊乱及动脉功能改变,颈动脉硬化参数、动脉内皮舒张功能与血清ADMA、ET-1和LEP水平独立相关,三者可能成为监测早期动脉粥样硬化发生发展的重要指标。