乙蒜素对马铃薯晚疫病的抑制作用研究

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马铃薯晚疫病危害甚大,因其毁灭性之强有“马铃薯癌症”之称,给农业生产带来的经济损失巨大。目前马铃薯晚疫病主要依赖于喷施化学农药进行防治,造成环境污染和粮食安全受到威胁,因此研究开发低毒高效的生物农药很有必要。乙蒜素为我国发明的生物农药,具有见效快、用量少、成本低等优点,已在多种农作物的真菌、细菌病害上推广使用。探究乙蒜素对马铃薯晚疫病的抑制效果,解析其抑菌机制对于马铃薯晚疫病的防治具有十分重要的意义。本研究以致病疫霉的T30-4和88069菌株为研究对象,分析乙蒜素对致病疫霉菌丝生长、产孢能力、孢子萌发和毒力的抑制效果;乙蒜素处理致病疫霉菌丝后,进行蛋白质组学和代谢物组学分析,进行抑菌机制研究。得到以下实验结果:(1)乙蒜素处理致病疫霉T30-4和88069菌株,结果显示乙蒜素能够抑制致病疫霉的菌丝生长、产孢能力、孢子萌发和致病力,并且具有剂量依赖效应,表明乙蒜素对于马铃薯晚疫病有一定的抑制效果。(2)使用IC50浓度的乙蒜素处理致病疫霉T30-4菌株后,进行代谢物组学分析,乙蒜素处理致病疫霉T30-4菌株后,氨基酸是变化最为显著的差异代谢物且其表达量显著下调,这说明乙蒜素显著抑制致病疫霉的氨基酸代谢。由于氨基酸是蛋白质的基本组成单位,因此乙蒜素可能通过抑制氨基酸代谢从而抑制病原菌体内的蛋白质合成。(3)蛋白质组学分析表明,GO和KEGG通路分析发现,核糖体变化最为显著且富集到核糖体的差异表达蛋白表达量以下调为主,这说明乙蒜素显著抑制了病原菌的核糖体功能。核糖体是蛋白质合成的场所,因此乙蒜素可能通过抑制病原菌的核糖体功能,从而抑制蛋白质的生物合成。此外,BCA法蛋白定量进一步证实了蛋白质组学分析结果。(4)乙蒜素处理后测定马铃薯植株的生长指标(株高、茎粗、结节数和叶片数),结果显示乙蒜素对马铃薯植株正常生长没有影响;盆栽实验表明乙蒜素对马铃薯晚疫病有一定的抑制效果,大田实验表明,乙蒜素和化学农药银法利复配能减少化学农药的使用量,且达到同等防治效果。综上,乙蒜素能够对马铃薯晚疫病产生一定的抑制效果,并且通过蛋白质组学和代谢物组学分析可知,乙蒜素主要是通过抑制核糖体功能及氨基酸代谢,从而抑制致病疫霉蛋白质合成,最终达到抑制马铃薯晚疫病的效果。
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