丝素蛋白/硅酸钙/壳聚糖表面改性骨组织工程支架的制备及其性能研究

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目的:在口腔颌面外科领域,颌面部创伤、肿瘤、先天畸形等疾病导致的骨缺损十分常见。各种程度的骨缺损严重影响颌面部形态和功能,对患者生活造成了不便。骨组织工程在无需取自体骨或移植异体及异种骨的基础上,能够有效恢复骨缺损。本实验利用组织工程原理,制备出丝素蛋白/硅酸钙/壳聚糖复合骨组织工程支架,并对表面进行改性从而改善其成骨性能,检测了支架的物理及生物学性能,旨在构建表面能够针对成骨进行改性优化的组织工程支架材料,从而恢复骨缺损。方法:利用天然蚕丝作为原料,通过脱胶和透析的原理,提取可降解丝素蛋白生物材料;使用冷冻干燥技术,将丝素蛋白、壳聚糖、硅酸钙等材料混合均匀后,制备出三种成分复合的支架;使用多巴胺对制备的组织工程支架进行表面改性,使其获得粘附负载性能,改善材料表面的生物活性,并利用多巴胺的粘附效果负载成骨药物,获得针对成骨进行优化的组织工程支架;通过扫描电镜观察支架表面形态,分析支架的微观特征;检测支架的力学性能、孔隙率、降解速率等参数,对其物理性能进行评价;培养小鼠前成骨细胞系,通过CCK-8方法,评价支架的生物相容性,判断本实验支架应用于体内实验的潜能。结果:1、通过以上材料制备得到的支架,具备结构均匀、稳定、疏松多孔等特点,扫描电镜观察其孔径、微观形貌等满足骨组织工程的需要;2、可成功对材料表面生物活性加以优化并且负载药物,表面改性和负载药物前后,支架的力学性能、孔隙率、降解速率等无明显变化,均符合组织工程支架的要求,证明表面改性和负载药物对支架内部结构无明显影响,不会造成支架物理性能的变化;3、CCK-8检测表明细胞在支架的浸提液中能够正常生长繁殖,空白支架、改性支架及载药支架各组之间吸光度值无明显差异,说明本实验对支架的表面改性及负载药物不会影响支架的生物相容性,制备的新型表面成骨优化的支架安全无毒,可进一步应用于体内实验以研究其成骨潜能。结论:制备得到的丝素蛋白/硅酸钙/壳聚糖表面改性支架结构均匀,表面形态、孔径大小和孔隙率适宜,符合骨组织工程的需要,支架在体液环境下能够缓慢降解及释放成骨药物,且改性和载药后支架无细胞毒性,能够应用于骨组织工程。
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