本研究为建立发酵法制备生物中药的方法,通过对黄芪,党参等九种中草药与芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌等6株微生物之间的协同作用研究,筛选出适宜的菌种与目标中草药,建立了有效的筛选模型;而且探索了底物浓度、时间、接种量、灭菌温度与时间、转速等因素对实验室发酵法制备生物中药的影响,并制得一种新的生物中药制剂。最后研究了新的生物中药对0～4周龄肉仔鸡的生产性能、免疫功能、肠道菌群的作用,以分析生物中药替代抗生素的可行性。 1 试验一通过测定微生物的生物量(OD值,λ=660nm)的方法研究黄芪、党参等九种中草药与芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌等6株微生物之间的协同作用,筛选具有协同作用的微生物与中草药用于制备生物中药制剂。结果表明:黄芪、党参等扶本固正类中草药能促进芽孢杆菌1.769、SOD、D01、乳酸菌LB006、红酵母、白酵母的增殖(P<0.01),而大黄、黄连、贯众等则对它们的生长呈现抑制作用。其中黄芪对乳酸菌LB006的促菌作用最为明显,在添加量0.0125%时就达到差异极显著(P<0.01),加0.1%时可以提高LB006的生物量62.6%,因而选择乳酸菌LB006与黄芪作为原料制备生物中药。 2 试验二探索了微生物发酵制备生物中药的方法,通过单因子多水平摇瓶试验研究影响因素的适宜参数。研究显示用乳酸菌LB006发酵黄芪制备生物中药的适宜实验室参数为:时间36h、接种量0.5ml(9.867×10~8CFU/ml)、底物浓度5.0/100ml、121℃高压灭菌20min、转速140r/min,得到的发酵液中乳酸菌LB006的活菌数达到10~9CFU/ml以上。其中发酵时间、底物浓度、灭菌时间与温度、转速等对发酵结果有明显影响(P<0.01),而乳酸菌LB006的接种量则对试验结果的作用不明显,主要可能是与基质中所提供的养分总量是一定的有关。 3 试验三选用1日龄艾维茵肉鸡250只,分成5个处理,每个处理分成5个重复,每个重复10只鸡。设置对照、抗生素、黄芪、生物中药A、生物中药B五个处理组,研究生物中药对肉仔鸡生产性能、免疫功能、肠道菌群的作用。试验结果表明:日粮中添加生物中药能显著提高0～4周龄肉仔鸡的日增重和日采食量(P<0.01),对降低料肉比作用不明显,但有下降的趋势,提高肉仔鸡的生产性能;显著显著提高肉仔鸡淋巴细胞的增殖率(P<0.01),增强机体的免疫功能和抗病力,但对肉仔鸡的免疫器官的发育作用不明显;而且还具有明显促进胃肠道乳酸菌等有益菌增殖(P<0.01)、抑制大肠杆菌、沙门氏菌等病原菌(P<0.01)、调节肉仔鸡胃肠道菌群平衡、维护机体健康的作用。从整体上效果上看,生物中药的作用效果要优于抗生素,所以可以用其替代抗生素在肉仔鸡饲料中使用,用于生产安全的禽肉产品。