柽柳MnSOD基因的克隆及功能验证

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wutiepeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究是从抗旱、耐盐植物柽柳中克隆MnSOD基因,构建到酵母表达载体pYES2上,并对其进行酿酒酵母的遗传转化,验证柽柳MnSOD基因的功能。主要实验结果如下: (1) 根据已克隆得到的柽柳MnSOD基因片段,采用RACE技术从柽柳中获得MnSOD的cDNA全长序列,699bp完整的开放读码框,编码232个氨基酸。其5非编码区为40bp,3非编码区为333bp。经生物信息学分析该蛋白质的等电点为7.10,分子量为26KD。 (2) 将MnSOD基因与酵母表达载体pYES2连接,获得了pYES-SOD重组质粒。将pYES-SOD转化酵母菌INVScl。随机挑选4个INVScl(pYES-SOD)单菌落,经PCR扩增证明MnSOD基因已构建到pYES2载体上。 (3) 对INVScl(pYES-SOD)和INVScl(pYES2)菌株进行诱导,研究外源基因MnSOD在酵母中的的表达情况。结果表明,INVScl(pYES-SOD)重组酵母经诱导后能够表达外源基因,超氧化物歧化酶活性最高达2.064U/g·min。 (4) 重组酵母INVScl(pYES-SOD)的NaCL、NaCO3、NaHCO3、干旱、紫外线等胁迫实验证明,INVScl(pYES-SOD)酵母的抗逆性明显高于对照INVScl(pYES2)菌株,实验结果说明在酵母受到逆境胁迫时,MnSOD基因表达的超氧化物歧化酶对酵母细胞起到了保护作用,同时也证实了来源于柽柳的MnSOD基因具有提高真核生物抗逆性的功能。 (5) 经RT-PCR、Southern印迹杂交检测表明,NaHCO3和NaCl胁迫处理能够使柽柳植物体内的MnSOD基因表达量明显升高,说明柽柳MnSOD基因与抗盐碱相关。
其他文献
本文是惠州市博罗县2015-2017年度中小学教育科研课题项目“小组合作学习让文言文教学更有效的研究”(课题批准号2015blkt39)研究成果。摘要:在进行文言文教学中,传统的教学方法大致都是逐字逐词的进行讲解,这种教学方法,不仅教学效率不高,不利于学生对文章的理解,而且会使学生厌学文言文。本文通过在课堂上运用“小组合作学习”的模式对文言文进行学习,这不仅使得老师在文言文教学中得到放松,同时也使
20世纪60年代末期,激素免疫学的产生为动物生殖调控提供了新思路。用外源性GnRH主动免疫动物,会刺激动物机体产生大量GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡的失调,改变下丘
在滇池蓝藻水华频繁爆发,束丝藻属与微囊藻属随季节演替,成为滇池蓝藻水华的两大优势种群,其中微囊藻属主要在夏季爆发,而束丝藻属主要在冬季爆发。由于冬季水体中CO的浓度高于夏
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
摘要:本文就“在道真民族地域文化中开发利用初中语文课程资源”这一问题,提出了在道真民族地域文化中开发利用初中语文课程资源,能充实完善课程文化,推动“义务教育语文课程标准”在民族地区的实施,实现语文课程培育学生语文素养与传承民族文化的双重功能的观点。重点阐述了开发利用的理论依据,实践意义,目标及应探索的主要内容。  关键词:道真民族地域文化;开发利用;课程资源一、问题的提出  1、道真仡佬族苗族自治
摘要:在当前互联网飞速发展的潮流下,小学生对于互联网的认识、理解和使用已不再陌生,如何充分的运用互联网技术、多媒体技术和移动APP等多种手段激发小学生学习语文的内生驱动力,如何更好的变革教学方法以适应课程改革的新目标和新标准,成为当前小学语文教学课题的重点和难点。因此,有必要在充分借鉴互联网技术的基础上,结合课堂导入、微课、微视频、VR情境模拟等新型的教学手段,有效推进小学语文教学方法的运用和创新
本文探讨了碲化镉量子点(CdTe QDs)对肝细胞的毒性效应及其影响因素,为探索量子点的肝毒性机制提供一定依据.采用人肝癌细胞(HepG2)和人正常肝细胞(L02)为细胞模型,设置0、25
<正>本刊讯5月7日,笔者在位于四川成都彭州市隆丰镇西北村的某园艺场看到,桂花树下间套种的成片芍药正绽放着美丽迷人的花朵。芍药花与牡丹花外貌酷似,芍药花还被称为继牡丹
期刊
土壤中的磷主要以非溶解形态存在,植物本身很难直接利用这部分磷,出现了土壤中磷含量很高,但是不能满足植物生长需求,利用微生物的溶磷作用弥补土壤磷素营养的不足,己成为当前国内
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.