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[目的]
1.观察番茄红素纳米分散体对鱼藤酮诱导的SD大鼠帕金森病模型的治疗作用及不同剂量番茄红素纳米分散体的作用效应差异;
2.探讨番茄红素纳米分散体对鱼藤酮诱导的SD大鼠帕金森病模型的治疗作用机制。
[方法]
1.采用乳化蒸发法制备番茄红素纳米分散体。
2.根据激光光散射法检测样品平均粒径和分布。
3.HPLC检测番茄红素纳米分散体中番茄红素含量。
4.通过离心、静置、不同温度、光照及金属离子接触等方法检测番茄红素纳米分散体稳定性，通过对过氧化氢和羟基自由基的清除作用研究其体外抗氧化活性。
5.采用随机数字表法将SD大鼠随机分为正常对照及造模组，通过长期颈背部皮下注射鱼藤酮的方法建立SD大鼠帕金森病模型。模型建立完毕，将筛选出的成功模型大鼠再次随机分为美多芭（阳性对照药）治疗组、番茄红素纳米分散体高剂量治疗组、番茄红素纳米分散体低剂量治疗组、空白乳化剂对照组、模型组（自然恢复），每组12只。美多芭组给予美多芭灌胃治疗，番茄红素纳米分散体高、低剂量组给予番茄红素纳米分散体灌胃治疗，空白乳化剂对照组给予空白乳化剂灌胃治疗，正常对照组和模型组大鼠给予生理盐水灌胃治疗。
6.治疗开始前及治疗结束后分别采用网格实验、悬挂实验及跨步实验检测SD大鼠行为学变化。
7.大鼠在最后一次治疗1天后，经麻醉、处死后取脑，每组随机取6只剥离黑质，经免疫组化法检测石蜡切片中大鼠中脑黑质区TH阳性细胞表达情况，计数阳性细胞数。其余大鼠分离中脑组织后分别检测大鼠中脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量，并采用Western blotting法检测各组大鼠黑质α-突触蛋白表达情况。
[结果]
1.通过乳化蒸发法制备得到的番茄红素纳米分散体的Z-Ave粒径为230.3 nm，PDI值为0.208，浓度为192μg/ml，其水溶性得到改善，体外抗氧化活性增强。制备得到的番茄红素纳米分散体稳定性受紫外光、高温、Fe3+和Cu2+等金属离子影响显著，在低温、避光条件下保留率较高。
2.行为学改变:鱼藤酮处理使SD大鼠的一般行为学表现发生了改变，使用番茄红素纳米分散体可使SD大鼠一般行为学表现得到一定程度的恢复。同正常对照组相比，模型组大鼠在网格实验中的反应时间增长，悬挂实验中得分降低，跨步数减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。同模型组（自然恢复）相比，番茄红素纳米分散体高剂量组及美多芭组在网格实验中的反应时间减少，悬挂实验中得分提高，跨步数显著增加（P＜0.05）。番茄红素纳米分散体低剂量组及空白乳化剂对照组同模型组（自然恢复）比较无明显差异（P＞0.05）。
3.TH阳性细胞检测:正常对照组平均TH阳性细胞数为107.33±16.74个，模型组平均TH阳性细胞数为48.83±12.83个，与正常对照组相比，模型组平均TH阳性细胞数减少(P＜0.05）。与模型组相比，美多芭组和番茄红素纳米分散体高剂量组平均TH阳性细胞数明显增加（P＜0.05），番茄红素纳米分散体低剂量组及空白乳化剂组平均TH阳性细胞数同模型组无明显差异（P＞0.05）。
4.中脑氧化应激水平测定:同正常对照组相比，模型组SOD活性和GSH含量下降明显(P＜0.05)，MDA含量出现明显上升（P＜0.05）;同模型组相比，纳米分散体高剂量组及美多芭组SOD活性明显上升(P＜0.05)，GSH含量增加(P＜0.05），MDA含量明显下降(P＜0.05)，空白乳化剂组与模型组、纳米分散体低剂量组差异不明显，各检测指标无统计学差异（P＞0.05）。
5.α-突触核蛋白表达检测:正常对照组α-syn蛋白条带与内参GAPDH蛋白条带经灰度扫描后其灰度值的比值为0.58±0.03，模型组灰度值的比值为1.08±0.05，同正常对照组相比，模型组α-syn蛋白表达上升明显(P＜0.05);同模型组相比，纳米分散体高剂量组及美多芭组α-syn蛋白表达出现一定的下降(P＜0.05)，纳米分散体低剂量组α-syn蛋白表达下降不明显(P＞0.05)，空白乳化剂对照组同模型组α-syn蛋白表达无明显差异(P＞0.05)。
[结论]
1.经乳化蒸发法制备的番茄红素纳米分散体符合纳米化的范畴，其水溶性得到显著改善，体外抗氧化活性增强。经纳米化后的番茄红素在低温、避光条件下稳定性较好，Fe3+和Cu2+对番茄红素纳米分散体稳定性影响较大。
2.鱼藤酮能引起SD大鼠行为学改变，出现PD样病理症状，诱发中脑黑质多巴胺能神经元特异性损害和死亡。长期颈背部皮下注射鱼藤酮的方法能够建立SD大鼠帕金森病模型。
3.高剂量番茄红素纳米分散体对鱼藤酮诱导的PD大鼠模型具有一定的治疗作用。
4.高剂量番茄红素纳米分散体对鱼藤酮诱导的SD大鼠帕金森病模型的治疗作用与抗氧化应激有关。