内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(edothelialmonocyteactivatingpolypeptideⅡ，EMAPⅡ)是由前体物质proEMAPⅡ分解而成的，能够改变内皮和单核细胞的功能，具有促进细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成的特性，目前EMAPⅡ主要被用于肿瘤治疗的实验研究。为了获得大量有活性的EMAPⅡ，本研究开展了对BmEMAPⅡ基因的克隆、转录水平差异及重组表达的研究。　　 本实验根据已公布的家蚕基因组精细图谱和EST等公共数据库的序列信息，我们设计特异性引物克隆出家蚕BmEMAPⅡ基因的cDNA和DNA序列，获得ORF和其全长序列，分别为870bp和1186bp。全长序列由3个外显子和2个内含子组成，该基因ORF编码289个氨基酸，预测蛋白分子量约为32kDa，理论等电点为8.31；该蛋白属于亲水性蛋白，没有明显的跨膜结构域，无明显的信号肽，且亚细胞定位在线粒体或胞外的可能性很小，最有可能位于其它部位。邻接法构建的进化树显示家蚕与二化螟亲缘关系最近，与哺乳动物人和小鼠的距离较远。　　 提取家蚕不同时期和不同组织的总RNA，以M-MLV反转录第一链cDNA，以家蚕18SrRNA基因做内参，进行了半定量RT-PCR。结果表明BmEMAPⅡ基因除了在蛹期的体壁、出蛾当天的翅膀中不表达，在其它的组织中都表达，这说明家蚕内皮单核细胞激活多肽Ⅱ基因在不同时期和不同组织中的表达是有差异的。　　 将扩增的ORF片段连接至pET-28a(+)表达载体，并诱导其原核表达，经免疫印迹检测确认BmEMAPⅡ在E.coliBL21(DE3)菌株中得到了成功的表达。用IPTG进行了不同浓度的诱导表达，经SDS-PAGE电泳和Westernblot检测，表明被诱导的目的蛋白均得到了稳定的表达，这为以后对BmEMAPⅡ蛋白的真核表达及其功能的进一步研究奠定了基础。