针刺干预便秘模型小鼠肠运动作用及机制研究

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 12次 | 上传用户:curtises
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目的:观察针刺对便秘模型小鼠首次排便时间、12h排便粒数和肠道推进率的影响,比较单穴之间,穴组与相应单穴之间、穴组之间对便秘治疗的效果,探讨穴位与穴位之间、穴位作用的协同性以及穴组与穴组之间差异性;并此基础上,观察针刺对便秘模型小鼠结肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)表达情况的影响,揭示针刺干预便秘模型小鼠小肠运动的作用机制,为经脉脏腑相关理论提供实验依据。方法:①单穴之间比较。选取健康体质量为20-30g的昆明小鼠60只,随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组、曲池组、上巨虚组,各组小鼠每日灌服复方地芬诺酯悬液,小鼠单只单笼饲养,鼠笼笼底垫有滤纸。模型复制前12h禁食,自由饮水。正常组正常饲养,模型组只进行模型复制不给予任何针刺治疗,天枢、大肠俞、曲池、上巨虚双侧取穴进行针刺。实验中记录各组小鼠第1次灌胃后的首次排便时间,收集和记录灌胃后12h内排便粒数,并以4d的累积量做为观察值。于末次治疗后1h,立即灌服半固体糊0.8ml/只。20min后脱颈椎处死小鼠,开腹,迅速取出小肠,轻轻剥离后直铺于白纸上,测量幽门至回盲肠部全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。以幽门至黑色半固体糊前沿的距离占幽门至回盲部全长的百分率为小肠推进率。并取长2cm结肠放入4%中性甲醛中固定、脱水、石蜡包埋、切片,选取相邻的切片用于免疫组化检测。②穴组与相应单穴之间比较。选取小鼠50只,分为正常组、模型组、天枢(双侧)、大肠俞(双侧)、天枢+大肠俞(单侧);选取小鼠50只分为正常组、模型组、曲池(双侧)、上巨虚(双侧)、曲池+上巨虚(单侧)。隔日交换对侧,检测指标及操作方法同上。③穴组之间比较。选取小鼠50只,分为正常组、模型组、天枢+大肠俞组(双侧)、曲池+上巨虚组(双侧)、四单穴(取单侧天枢、大肠俞、曲池、上巨虚)。检测指标及操作方法同上。④针刺干预便秘模型小鼠小肠运动的作用机制。选取正常组模型组,以及针刺效果最好的四单穴组,每组取8张切片,并计算ICC免疫染色阳性细胞个数。结果:①针刺单穴组之间比较。与正常组比较,模型组小鼠首次排便时间显著延长(P<0.01),12h排便粒数明显减少(P<0.01),肠道推进率明显降低(P<0.01);与模型组比较,各针刺单穴组小鼠首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h排便粒数明显增多(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.01)。②针刺单穴及相应穴组间比较。与正常组比较,模型组小鼠首次排便时间显著延长(P<0.01),12h粪便粒数明显减少(P<0.05),肠道推进率明显降低(P<0.01);与模型组比较,各针刺组首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h粪便粒数明显增加(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.05);天枢+大肠俞(单侧)组与曲池+上巨虚组(单侧)在首次排便时间、12h粪便粒数及肠道推进率方面均优于相应的单穴组(P<0.05)。③针刺穴组间比较。与正常组比较,模型组小鼠首次排便时间显著延长(P<0.01),12h粪便粒数明显减少(P<0.01),肠道推进率明显降低(P<0.01);与模型组比较,各针刺组小鼠首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h粪便粒数明显增加(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.05);四单穴(曲池+上巨虚+天枢+大肠俞)在首次排便时间、12h粪便粒数及肠道推进率等方面均优于天枢+大肠俞组及曲池+上巨虚组(P<0.05)。④ICC阳性细胞数的比较。与正常组比较,模型组小鼠ICC阳性细胞数明显减少(P<0.01);与模型组比较,针刺组小鼠ICC阳性细胞数明显增多(P<0.01)。结论:①针刺单穴(曲池、上巨虚、天枢、大肠俞)均对治疗慢性传输型便秘具有明显改善作用,其治疗效果差异无统计学意义。②针刺天枢+大肠俞组(单侧)的治疗效果优于针刺双侧的天枢组或双侧的大肠俞组,针刺曲池+上巨虚(单侧)治疗效果优于针刺双侧的曲池组或双侧的上巨虚组,提示穴位间具有协同作用。③针刺四单穴(曲池+上巨虚+天枢+大肠俞)的治疗效果优于天枢+大肠俞组与曲池+上巨虚组,提示针刺四单穴组方治疗效果最佳。④针刺治疗慢性传输型便秘可能通过上调结肠组织ICC表达来实现的。
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