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研究背景:先前的研究表明,高龄小鼠中调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的数量增加。然而,这些研究并未描述不同年龄段的Treg或这些免疫调节机制如何导致小鼠肝脏缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,IRI)中的免疫失调。目的:本研究旨在探究小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中Treg功能与年龄之间的关系。方法:本研究使用8周龄小鼠(8w)作为成年的低龄小鼠(Young-mice),使用40周龄小鼠(40w)作为衰老的高龄小鼠(Aged-mice),建立肝脏缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,IR)模型,检测肝脏损伤情况,肝组织凋亡情况以及炎症反应水平,流式细胞技术检测表达不同细胞因子的CD4~+T细胞比例、nTreg、Teff/nTreg比例及缺血再灌注后,活化的iTreg比例。体外诱导iTreg,研究高龄对iTreg分化的影响,采用CFSE共培养法研究高龄对iTreg体外抑制功能的影响,采用流式细胞技术检测CLTA-4、CD127等的表达情况。回输来自8w小鼠的iTreg(8w-iTreg)和40w小鼠的iTreg(40w-iTreg)至40w小鼠体内,建立缺血再灌注模型,检测肝脏损伤情况,肝组织凋亡情况以及炎症反应水平,采用流式细胞技术检测体内iTreg活化比例。结果:在肝脏缺血再灌注模型中,40w小鼠比8w小鼠遭受更严重的肝脏损伤。ALT、AST水平更高,肝脏活组织检查的组织学评分(SUZUKI评分)~1更高,肝脏组织凋亡细胞增加,炎症反应加剧,肝脏缺血再灌注后40w小鼠较8w小鼠的促炎性细胞因子IFN-γ、IL-6和IL-17表达水平更高。8w-iTreg在体外表现出更强的免疫抑制能力,并且在体内肝脏缺血再灌注期间具有更强的效应。与未进行iTreg回输治疗的小鼠相比,注射8w-iTreg和40w-iTreg的两组都降低了肝脏损伤和炎症反应水平。此外,与使用40w-iTreg或没有应用iTreg预处理的小鼠相比,用8w-iTreg预处理的高龄小鼠明显减轻了损伤。结论:随着年龄的增加,小鼠对于肝脏缺血再灌注损伤的耐受力下降。在高龄小鼠中观察到的肝脏缺血再灌注损伤的加剧是iTreg功能减退的结果。因此,改善iTreg功能对于高龄患者的疾病治疗是重要的。