硼替佐米对成肌细胞株C2C12的作用及其机制

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目的:旨在探讨硼替佐米对小鼠成肌细胞系C2C12的生长和分化的影响并探索影响过程中参与的信号转导通路。方法:(1)利用低浓度马血清(2%)体外诱导细胞分化,吉姆萨染色后显微镜观察;(2)吉姆萨染色观察硼替佐米对C2C12细胞分化的影响;(3)MTT法检测硼替佐米对C2C12细胞增殖的影响;(4)利用流式细胞术检测硼替佐米对C2C12细胞凋亡、周期的影响;(5)利用免疫印迹法和免疫荧光法检测硼替佐米对C2C12细胞分化、周期及凋亡影响的作用机制。结果:硼替佐米能抑制多核肌管的形成并伴随着Myogenin的低表达。用不同浓度的硼替佐米处理C2C12细胞,能引起C2C12细胞增殖能力浓度依赖性的降低。Annexin V/PI染色分析显示用硼替佐米处理C2C12细胞24h后能导致细胞显著性的凋亡,Cleaved caspas-3的检测也更加证实了这一点。硼替佐米引起的细胞凋亡和p-ERK蛋白表达降低有关。细胞周期结果显示用硼替佐米孵育24h会引起G2/M的累积。结论:结果表明医用硼替佐米浓度能抑制C2C12细胞的分化,抑制C2C12细胞的增殖,诱导C2C12细胞凋亡,引起C2C12细胞G2/M期的累积。细胞水平上的研究不支持硼替佐米临床上用于骨骼肌萎缩的治疗。
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