【摘 要】
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放线菌(Actinomycesbovis)是一类与人类生产和生活关系极为密切的重要微生物资源,是天然抗生素主要来源之一。特别是极端环境的放线菌,具有特殊的生理特性和代谢机制,能够产生特殊的次级代谢产物,是寻找挖掘新型天然抗生素的重要来源。本研究以从新疆盐碱地分离得到的一株具有高抑菌活性的丝状菌作为出发菌株,在确定分类归属的基础上,从生物学活性、发酵条件、抑菌物质的分离纯化等方面进行了探究,为进一步
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放线菌(Actinomycesbovis)是一类与人类生产和生活关系极为密切的重要微生物资源,是天然抗生素主要来源之一。特别是极端环境的放线菌,具有特殊的生理特性和代谢机制,能够产生特殊的次级代谢产物,是寻找挖掘新型天然抗生素的重要来源。本研究以从新疆盐碱地分离得到的一株具有高抑菌活性的丝状菌作为出发菌株,在确定分类归属的基础上,从生物学活性、发酵条件、抑菌物质的分离纯化等方面进行了探究,为进一步开发利用该菌株奠定了基础。本论文主要研究结果如下:(1)形态学观察、生理生化试验和分子鉴定试验,表明出发菌株隶属于放线菌目,链霉菌属(Streptomyces)的蓝色类群,并命名为菌株XJ-16。XJ-16具有不耐温、非嗜盐和具有一定嗜碱性特征;酶谱分析表明XJ-16能够分泌纤维素酶、脂肪酶、脲素酶、蛋白酶、过氧化氢酶和脂肪酶。(2)发酵液抑菌实验表明,除了肺炎克雷伯菌S型没有抑制作用外,XJ-16的发酵液对5株病原细菌指示菌具有较强的抑菌活性;除了对假丝状酵母真菌—白色念珠菌有抑制作用,对5株病原真菌指示菌没有有抑菌活性;XJ-16发酵液次级代谢产物抑菌活性物质对酸碱耐受不同,对酸耐受较强、稳定,碱性条件,活性降低;对温度、紫外光敏感,易失活。(3)抑菌活性培养基优化表明,XJ-16抑菌活性最强的最佳培养基组成为:可溶性淀粉2 g,硝酸钾0.1 g,氯化钠0.05 g,三水磷酸氢二钾0.05 g,硫酸镁0.05g,蒸馏水100 mL,pH 5,发酵条件为接种量为1%,培养温度28℃,180 r/min,发酵时间10天,在该优化条件下,菌株发酵液对指示菌的抑菌率达65.48%,抑菌活性最强。(4)有机物萃取实验表明,最佳萃取剂是乙酸乙酯;pH纸层析初步鉴定抑菌物质抗生素种类为碱性类抗生素;采取薄层层析、硅胶柱层析、酶标仪、半制备HPLC、HPLC等分离技术,进一步纯化出一种物质,表明该物质在流动相比例甲醇:水为80%:20%,检测波长280 nm,在HPLC上的保留时间为13.261 min。
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