肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic Escherichia coli，EHEC)O157∶H7是一种重要的动物源性致病菌，易引起婴幼儿及老人腹泻、出血性结肠炎(HC)、血栓形成性血小板减少性紫癜(TTP)及溶血性尿毒综合征(HUS)等严重并发症，部分HUS病例可致死亡。该菌长期驻留于牛、羊、猪、鸡等家畜家禽的肠道中，牛是主要的贮存宿主。该菌造成幼龄动物腹泻，并污染畜禽产品及水源和农作物等，给农牧业带来巨大的损失，也对人们的健康构成巨大威胁。　　 1.大肠杆菌O157∶H7的检测和分离　　 从南京各个地区采集新鲜样品420份，其中粪便样品350份，蔬菜50份，肉类10份，牛奶10份，增菌后，免疫磁珠富集，涂布筛选性培养基，菌株在改良山梨醇-麦康凯培养基(CT-SMAC)培养后菌落呈圆形、表面湿润、半透明样，挑取可疑菌落进行rfbE/fliC二重PCR，同时用O157和H7诊断血清做玻片凝集试验进行鉴定。结果成功分离到5株出血性大肠杆菌O157∶H7。所采集样品的肠出血性大肠杆菌O157∶H7检出率分别为8％、2％、0％、2％、2％。革兰氏染色为阴性杆菌，并且有1株迟缓性发酵山梨醇麦康凯培养基。　　 2.大肠杆菌O157∶H7分离株的鉴定　　 设计毒力因子stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物，针对已分离的O157∶H7菌株进行PCR鉴定，并进行生化试验和药敏试验。毒力基因检测显示:其中4株毒力因子表型为stx1-stx2+eae+hlyA+tccp+，另有一株表现型为stx1+stx2+eae+hlyA+tccp+，各菌tccp基因均为阳性，但携带的重复片段数量有差异。不同牛场的分离菌株的耐药性差异较大，其中6#对氨苄青霉素、卡那霉素、先锋V、链霉素有强的耐药性。　　 3.大肠杆菌O157∶H7分离株的小鼠致病性　　 通过灌胃攻毒方式研究血性大肠杆菌O157∶H7对BALB/C小鼠致病性:选用八周龄小鼠，用链霉素处理小鼠，再分别以1×1010CFU同剂量口服接种经PBS洗涤的五株O157∶H7分离株全菌，对感染后小鼠的临床症状和存活情况进行观察，结果显示:小鼠感染各分离菌后体内排菌时间分别为7、9、13、13、15d，存活率分别为40％、50％、60％、20％、50％。本研究为动物感染模型的构建打下了基础。