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miR319是一种保守的miRNA,已有研究发现它参与植物的生长发育、对干旱、寒冷及盐胁迫的应答,但在真菌胁迫应答方面的研究几乎没有。本实验旨在利用生物学实验方法研究植物miR319c及其靶基因在灰霉菌侵染植物过程中的生物学功能。得到的主要实验结果总结如下:(1)RT-qPCR检测发现,miR319c在感染灰霉菌的番茄中表达下调,靶基因TCP24和TCP29的表达上调,说明miR319c可能通过调节靶基因参与番茄叶片对灰霉菌感染的响应。(2)在转基因拟南芥和转基因番茄中,miR319c得到了过量表达,相应地,其5个TCP家族成员的靶基因表达显著下降。(3)接菌实验证实,过表达miR319c的转基因拟南芥叶片和转基因番茄叶片没有明显的病斑,台盼蓝染色结果发现灰霉菌菌丝在过表达miR319c的植株相比于各自的野生型明显受到抑制,说明miR319c的过表达增强了转基因植株对灰霉菌的抗性。(4)基于过表达miR319c转基因植株表现的抗性,本研究对茉莉酸(JA)合成和信号转导相关基因、miRNA合成过程关键基因以及一些胁迫应答相关miRNA的表达进行了RT-qPCR检测。其中,JA合成和信号转导相关基因表达大多数都呈上调,可能JA响应灰霉菌的诱导从而激活下游相关防御反应;另外,实验结果显示植物响应胁迫相关miRNAs的表达受miR319c过表达的影响;miR319c的过表达或者灰霉菌的侵染对miRNA合成途径主要基因的表达没有明显的影响。(5)基于RNAi技术和过表达手段,构建了miR319靶基因TCP的RNAi载体和过表达载体,并导入拟南芥。总之,本实验成功获得了ath-miR319c过表达的转基因拟南芥和番茄植株,揭示了miR319c的过表达增强了转基因植株对灰霉菌的抗性。