背景:妊娠期高血压是最常见的妊娠期内科并发症,在世界范围内的发病率高达10%,是孕产妇和围生儿发病和死亡的主要原因之一。随着高龄和肥胖产妇越来越多,这一发病率呈逐渐上升的趋势。子痫前期其中重度子痫前期是一类危及生命的多系统疾病,其并发症包括子痫、HELLP(溶血,肝酶升高,低血小板数)综合症、肾功能损害、肺水肿、胎盘早剥以及胎儿宫内死亡等。深入研究妊娠期高血压的病理生理过程、完善诊断与治疗策略,对于临床的早期干预,改善母婴结局具有重要意义。但是目前妊娠期高血压的病理生理仍不清楚。深入研究妊娠期高血压的病理生理过程、完善诊断与治疗策略,对于临床的早期干预,改善母婴结局具有重要意义。免疫适应不良、胎盘发育不足、胎盘缺血、氧化应激以及血栓形成这些因素被认为是疾病发展的关键因素。妊娠期高血压的发病还与滋养层细胞的异常入侵导致子宫螺旋动脉重建不充分有关,从而造成子宫胎盘的血流减少。同时,子痫前期孕妇滋养层血管侵入较浅,导致子宫胎盘循环缺陷,最终导致胎盘缺血。血液灌注不良且缺氧的胎盘会释放一些细胞因子,导致母体的血管收缩和高血压的发生。因此,妊娠期高血压被认为是与炎症异常相关的多因素导致的疾病。妊娠期高血压的临床特征是广义的血管收缩和子宫胎盘灌注受损[1]。内皮细胞维持了血管张力的稳定性,参与血液凝固以及炎症反应[2-7]。因此,内皮细胞的活化和功能失调会影响血管收缩,导致血压升高、血栓形成和炎症[8-13]。内皮细胞与体内炎性细胞的相互作用,如白细胞之间的相互作用被认为在妊娠期高血压的发病过程中起重要作用,在子痫前期胎盘中有明显的慢性血管炎表现[14]。近期一些研究证实,子痫前期的发病原因主要是由于子宫胎盘的血运受阻,导致胎盘缺氧、缺血。而在这种应激条件下,胎盘会释放许多细胞因子进入母亲血液中导致孕妇各种临床表现的发生[15,16]。目前已经有较多关于子痫前期孕妇体内细胞因子水平的研究报道[17,18]。以往的研究表明,免疫激活的内皮细胞以及循环中的巨噬细胞、单核细胞、淋巴细胞等会产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-6(IL-6),而TNF-α以及IL-6又是重要的促进炎症反应的细胞因子,参与多种免疫应答。近年来,许多生理生化标志物逐渐被发现,用来预测子痫前期的发生。但更加可靠的、经济的、可重复的检测方法仍需进一步探寻。目前已有报道,子痫前期与母体对胎盘的过度的炎症有关,主要与白细胞和血小板的活化、内皮细胞粘附分子的表达上调以及子痫孕妇血液循环中的P-selectin等有关[19]。并且,促炎性细胞因子如TNF-α和IL-6的水平在子痫前期也会发生改变[20]。子痫前期胎盘释放的可溶性细胞因子的鉴定成为目前妊娠期高血压研究的主要方向。先天性免疫的激活,特别是炎症因子TNF-α以及IL-6的释放与子痫前期密切相关[21]。目的:本研究拟研究妊娠期高血压孕妇促炎因子TNF-α以及IL-6水平与妊娠期高血压病理生理之间的潜在关联,并建立低氧(暴露于100%氧气中)诱导的妊娠期高血压小鼠模型进一步验证TNF-α以及IL-6水平与妊娠期高血压病理生理之间的密切关系,通过曲前列尼尔(Remodulin)处理妊娠期高血压小鼠,探究将血清TNF-α以及IL-6水平作为妊娠期高血压诊断及治疗预测标志物的可行性。方法:研究对象招募于2014年5月至2015年5月在山东大学附属省立医院产科就诊的59名孕妇,并分为2组。正常对照组为32名无并发症的正常妊娠妇女;子痫前期组为27名患者孕20周后出现收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg,伴蛋白尿。采用酶联免疫法(ELISA)检测对正常孕妇以及子痫前期的孕妇血清中TNF-α以及IL-6的含量。为了进一步验证人体内发现的TNF-α以及IL-6与妊娠期高血压的关联,我们建立了低氧(暴露于10%氧气中)诱导的妊娠期高血压小鼠模型。低氧暴露与未低氧暴露小鼠组相比,低氧暴露组小鼠右心室收缩压(RVSP)显著升高,表明妊娠期高血压小鼠模型建立成功。通过酶联免疫法(ELISA)、荧光实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)、免疫组化检测低氧诱导的妊娠期高血压小鼠模型血清及肺组织中TNF-α以及IL-6的表达。为了进一步验证血清中TNF-α以及IL-6的水平是否可作为妊娠期高血压治疗效果的生物标志物,我们也采用酶联免疫法检测曲前列尼尔(Remodulin)治疗后妊娠期高血压小鼠血清TNF-α以及IL-6的水平。结果:(1)结果发现,与正常孕妇相比,子痫前期孕妇血清中TNF-α以及IL-6的含量显著上升,TNF-α和IL-6水平的上升趋势与并发症的严重程度相关。肺动脉压力平均值≥50 mmHg孕妇血清中TNF-α的水平明显高于肺动脉压力平均值<50 mmHg的孕妇。(2)动物实验结果发现,在低氧诱导的妊娠高血压模型小鼠的血清中TNF-α和IL-6的水平显著上升,肺组织免疫组化结果也显示,低氧诱导的妊娠高血压小鼠模型中TNF-α以及IL-6的水平显著上升。并且血清中TNF-α以及IL-6的水平与右心室收缩压(RVSP)呈正相关。(3)采用曲前列尼尔(remodulin)处理妊娠高血压组小鼠后,其血清中TNF-α以及IL-6水平相比未处理的妊娠高血压组小鼠显著降低。其中TNF-α的表达量相比对照组下降了约50%,IL-6的表达量相比对照组下降了约40%。而且能够降低低氧诱导妊娠高血压组小鼠的右心室收缩压。提示,曲前列尼尔治疗能够显著抑制低氧诱导的妊娠期高血压的发病进程。结论:结合临床数据和动物实验结果,本研究揭示了血清TNF-α以及IL-6含量的升高与妊娠期高血压的病理生理过程密切相关。曲前列尼尔能够明显降低妊娠高血压小鼠体内的TNF-α和IL-6的水平,能够显著抑制低氧诱导的妊娠高血压的发病进程。因此,血清TNF-α以及IL-6的水平可以作为一种潜在的预测标志物来用于妊娠期高血压的临床诊断与治疗。