Spinigerin α抗菌肽的理化特性及应用研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:aman25826882
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抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,对细菌、部分真菌、病毒、原虫、肿瘤细胞都具有杀伤作用,它的杀菌和安全无毒害的作用特点使得它具有做天然食品防腐剂的潜在应用价值。Spinigerin抗菌肽是一种来源于白蚁的线性抗菌肽,包括25个氨基酸,不含半胱氨酸,呈a-螺旋结构。本研究采用凝胶加热-层析法,对Spinigerin a抗菌肽表达液通过水浴加热至100℃保持20-30min,除去不耐热的部分蛋白,经葡聚糖凝胶Sephadex G-25脱盐层析分离得到Spinigerin a抗菌肽提纯物。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱绘制相对分子质量标准曲线,计算Spinigerin a抗菌肽的相对分子质量。以大肠杆菌为受抑菌,采用琼脂孔穴扩散法,进一步研究Spinigerin a抗菌肽的自身浓度、温度、pH、及盐离子浓度等理化特性对其抑菌活性的影响。将新鲜牛奶加热分成4组装瓶,组1为对照组,然后向剩余3个处理组中分别加入不同量的Spinigerin a抗菌肽,每3天测定其细菌总数、pH值和感官评定打分,研究其Spinigerin a抗菌肽对牛奶的防腐保鲜情况。研究结果表明:(1)经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验,在图谱上表现为单一条带。Spinigerin a抗菌肽的相对分子质量约为2.74kD。(2) Spinigerin a抗菌肽的自身浓度、温度、pH、及盐离子浓度等理化特性对其抑菌活性均有重要影响。Spinigerin a抗菌肽对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌(革兰氏阴性菌)和金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为0.5mg/mL、0.3mg/mL、0.2mg/mL。Spinigerin a抗菌肽具有良好的耐热性和耐酸碱性,以大肠杆菌为受抑菌,当抗菌肽加热30min温度至60℃~100℃时,抗菌肽抑菌效果依然明显,当处于pH值6.0~8.0的近中性环境中,Spinigerin a抗菌肽的抗菌活性最强。Spinigerin a抗菌肽盐离子具有较好的抗离子作用,当盐离子浓度在0.5-0.7mol/L的条件下放置2h,仍具有一定的抑菌活性,当盐离子浓度达到0.9-1.1mol/L时,Spinigerin a抗菌肽抑菌活性基本消失。(3)当以0.4g/kg的标准向牛奶中的加入Spinigerin a,明显的控制了细菌总数上升;随着牛奶中Spinigerin a量的增加对其pH的抑制力较显著;经过感官评定打分,加入Spinigerin a的牛奶明显比对照组的牛奶的气味、滋味、口感等要良好。因此,Spinigerin a抗菌肽对牛奶的防腐保鲜有一定的潜力。
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