竹笋壳提取物的成分和生物活性研究

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竹笋是我国重要的林业资源。竹笋富含多种营养成分,既有营养价值也有药用价值。近年来还发现竹笋具有减肥、防癌、降血脂、抗衰老等多种保健功能。我国虽然竹笋资源丰富,但是总体利用率并不高。因此,加强对竹笋的综合研究与利用,对于提高资源利用率和产生更大的经济价值有举足轻重的作用。本文以竹笋壳为原料,利用超声波辅助-有机溶剂提取法提取活性物质,并经大孔树脂初步分离纯化,完成了以下几个方面的工作:1.竹笋壳提取物的GC/MS分析研究以N,O-双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺(BSTFA,含1%的三甲基氯硅烷TMCS)为衍生化试剂,采用气相色谱-质谱联用技术及运用面积归一化法鉴定竹笋壳提取物中所含有效成分。结合气相色谱-质谱标准谱图库NIST进行人工分析,在分离出的28种化学成分中分析出了15种物质的化学结构,其中有11种物质是常见脂肪酸,2种物质是酚酸,1种物质为乙磺酸,1种物质为脂肪酸酯。15种化学成分的相对含量(%)占总成分的51.19%,脂肪酸的相对含量(%)占总成分的29.71%,酚酸的相对含量(%)占总成分的10.96%。结果表明,竹笋壳提取物中脂肪酸含量较高。2.竹笋壳提取物中酚类物质的HPLC分析研究为了进一步探讨竹笋壳提取物的组成成分,采用高效液相色谱,梯度洗脱程序定性定量地测定竹笋壳提取物中所含的酚类物质。色谱分析条件:色谱柱为zorbaxSBC-18,柱温为25℃,检测波长为280nm,流动相A为1.0%醋酸水溶液、B为1.0%醋酸甲醇溶液,洗脱程序为0-15min 10%-26%B、15-30min 26%-40%B、30-50min40%-65%B、50-60min 65%-95%B、60-63min 95%-10%B、63-70min 10%B,流速为1.0mL/min。实验结果表明:竹笋壳提取物中含有没食子酸、表儿茶素、对香豆酸3种酚类物质,其中没食子酸的含量为0.79mg/L,表儿茶素的含量为7.27 mg/L,对香豆酸的含量为76.66 mg/L3.竹笋壳提取物抗氧化活性研究以竹笋壳为原料,利用超声波轴助-有机溶剂提取法提取竹笋壳中多酚,并从还原力及对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)的清除能力四个方面考察了竹笋壳多酚的抗氧化活性。实验结果表明:在试验浓度范围内,竹笋壳多酚有较强的还原能力,对O2-·、·OH、DPPH具有较强的清除作用,并随浓度的增加而增强;竹笋壳多酚对OH、DPPH的清除能力均低于同浓度Vc、苹果多酚的清除能力;当浓度小于0.28mg/mL时,其对O2-·的清除能力低于同浓度Vc、苹果多酚的清除能力,但当浓度大于0.28mg/mL时,其清除率却高于苹果多酚。4.竹笋壳提取物抑菌活性研究采用双层平板打孔法研究竹笋壳提取物对食品中常见的4种细菌和3种真菌的抑制作用,同时考察温度和紫外照射对其抑菌活性稳定性的影响。实验结果表明:竹笋壳提取物对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、大肠杆菌(Escherichia coli)这4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为8.75 mg/mL.4.375 mg/mL、35 mg/mL、35 mg/mL,对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、黑曲霉(Aspergillus niger)、根霉(Rhizopus stolonifer)这3种真菌没有抑制作用;竹笋壳提取物的抑菌活性具有很好的热稳定性;对于不同菌种,竹笋壳提取物的抑菌活性具有不同的紫外光稳定性。综上所述,竹笋壳提取物中含有多种生物活性成分,具有一定的抗氧化活性和较强的抑菌活性,有望开发成新型天然抗氧化剂和天然防腐剂添加到食品和化妆品中。GC-MS测定结果,一方面为竹笋壳提取物的抗氧化和抑菌作用的作用机理探讨提供了理论依据,另一方面启示人们可以从竹笋壳中提取天然单体成分如棕榈酸、苹果酸等。HPLC测试结果表明,竹笋壳提取物中对香豆酸含量较高,通过与其他分离纯化技术相结合,竹笋壳有望成为制备对香豆酸标准品的一大来源。因此,竹笋壳具有较好的开发潜力,本实验为竹笋壳的进一步开发利用提供了理论依据。
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