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锌指蛋白基因zfp36是一类具有手指状结构域的转录因子,在基因表达调控、细胞分化、胚胎发育、增强植物抗逆性等方面具有重要的作用,该基因在小鼠和人与关节炎、自身免疫疾病、骨质增生等综合症相关。但是目前有关山羊zfp36基因的研究未见报道。对山羊zfp36基因进行结构分析、探讨其变异情况及种群特异性,研究该基因的组织表达差异,可为今后进一步开展该基因功能研究奠定基础。本研究运用RT-PCR方法克隆了山羊zfp36基因的编码区序列;运用Bioedit、BLAST、SMART、ProtParam、SCOPMA等在线工具和软件,对山羊zfp36基因进行生物信息学分析;结果显示,山羊zfp36基因的编码区长度为978bp,编码325个氨基酸;同源比对发现山羊zfp36基因与人类、猪、牛、绵羊和大鼠的核苷酸序列一致性分别达到86%、89%、98%、99%、82%。以济宁青山羊、雷州黑山羊、南江黄羊、辽宁绒山羊为研究对象,运用PCR-SSCP方法检测其品种间多态性,并探讨不同基因型在品种间的分布规律;结果显示在外显子未发现SNPs,在内含子上检测到了一个SNPs位点,为A/T碱基置换,群体遗传学分析表明其突变频率分布具有品种特异性。通过构建zfp36基因编码区的重组原核表达载体pet30-a-zfp36,并对表达条件进行优化,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测出成功表达的山羊ZFP36蛋白。运用实时定量RT-PCR方法研究了山羊zfp36基因在心、肝、脾、肺、肾、脑、肠、胃8个组织中的表达情况,结果显示,zfp36基因在检测的8个组织中均有表达,但相对表达量存在显著差异,在肾和肝组织中表达量最高,在脑和心脏中表达量较低。结果表明,zfp36基因的结构和功能在物种间相对保守,特别是在山羊的外显子区域,群体遗传学表明,其突变频率分布具有品种特异性。成功表达出的目的蛋白约为33KD,与预测结果一致,并且以可溶形式存在。组织表达谱分析表明,zfp36基因在肾和肝组织中表达量最高,在脑和心脏中表达量较低,存在一定的组织特异性。