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目的:非编码小分子RNA(miRNAs)长度约22个核苷酸,通过结合靶基因m RNA 3′非翻译区(3′UTR)的互补序列,导致m RNA降解或抑制蛋白翻译,从而调节相关靶基因表达,在机体内各种生理及病理过程中发挥重要作用。有研究表明,miRNAs参与细胞增殖、分化和凋亡等生理过程。H2AX是组蛋白H2A家族一员,它不仅调节DNA损伤修复,还具有一项新的重要生理功能:凋亡调控作用。现已发现H2AX在肿瘤细胞凋亡中发挥关键调控作用,因而被认为是一种新的抑癌蛋白。本课题旨在探讨miRNA-328在肺癌中的功能与作用以及与组蛋白H2AX之间的关系,阐明miRNA-328通过H2AX表观遗传调控肺癌细胞凋亡的分子机制。方法:我们利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)基因表达数据库(GEO)中的四个数据库,GSE15008、GSE24709、GSE31568和GSE61741数据库,统计其中肺癌患者及正常对照组之间的miRNA-328的表达情况,揭示miRNA-328的表达与肺癌的相关性。使用三个不同浓度(100μM,10μM,1μM)的依托泊苷(VP16)诱导肺癌细胞凋亡,并检测miRNA-328表达水平,实验证明miRNA-328与肺癌细胞凋亡的关系。然后,转染miRNA-328和miRNA-328抑制分子,观察对肺癌细胞(A549和H1650)凋亡和周期的影响。使用Target Scan,mi Randa和mi Rbase软件预测miRNA-328下游潜在的靶基因H2AX,并通过q RT-PCR、western blot以及荧光素酶报告基因实验进行验证。最后,我们在A549和H1650细胞中共转染miRNA-328和缺失3’UTR区的H2AX,证实miRNA-328通过下调靶基因H2AX发挥凋亡调控作用。结果:NCBI基因表达数据库分析结果表明,miRNA-328在肺癌组织中高表达,提示与肺癌相关。肺癌细胞内转染miRNA-328,降低肺癌细胞对凋亡诱导的敏感性;而转染miRNA-328抑制分子,则刺激肺癌细胞对凋亡的敏感性。生物信息学分析提示组蛋白H2AX是miRNA-328潜在的靶基因。miRNA-328特异结合H2AX 3’UTR,下调肺癌细胞内H2AX表达水平。当miRNA-328和H2AX共转染时,miRNA-328抑制H2AX,并降低肺癌细胞对VP16诱导的凋亡作用。结论:组蛋白H2AX是miRNA-328靶分子;miRNA-328下调H2AX,进而对肺癌细胞凋亡发挥调控作用。