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目的:卵巢癌(Ovarian cancer,OC)由于其缺乏有效的早期诊断策略以及肿瘤的复发和耐药性,成为全世界死亡率最高的妇科恶性肿瘤。目前,卵巢癌主要的治疗方式还是肿瘤细胞减灭术辅以术后化疗,然而患者的预后水平仍较差,其中最常见的上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)的5年生存率小于30%。因此,迫切需要筛选和开发具有高灵敏度和特异性的生物标志物,这对于卵巢癌发病机制的阐明、早期诊断策略的研究以及开发新的治疗方式具有重要的指导意义。睾丸表达蛋白19(Testis expressed 19,TEX19)是近几年被鉴定的癌症/睾丸抗原(Cancer/testis antigen,CTA)之一并已被发现在多种肿瘤中高表达,但是TEX19在浆液性卵巢癌(serous ovarian cancer,SOC)的临床意义和功能中的研究还相对较少。本研究旨在探讨TEX19蛋白在SOC中的表达、临床意义及其对SOC细胞的增殖、迁移及侵袭的影响并进一步筛选用于设计抗肿瘤多肽疫苗的候选表位,为SOC新的生物标志物与治疗策略的进一步研究提供参考。方法:1.通过免疫组织化学评估98例人卵巢癌组织及癌旁组织TEX19蛋白的表达水平。2.利用ROC曲线确定TEX19蛋白表达水平的界值。3.分析TEX19蛋白表达水平与SOC患者临床病理参数的关系。4.通过Kaplan Meier plotter分析TEX19 m RNA表达水平与患者预后的相关性。5.利用Western blotting、q RT-PCR和免疫荧光实验检测TEX19蛋白和m RNA在卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞系中的表达水平。6.通过si RNA技术敲低TEX19,并进一步利用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验研究TEX19对SOC细胞株增殖、迁移和侵袭的影响。7.利用IEDB数据库和pepsite2在线分析工具用于筛选潜在的TEX19的HLA-A*0201限制性表位。8.通过T2亲和力实验验证通过上述方法筛选得到的表位肽与HLA-A*0201分子的结合能力。9.通过MOE分子模拟软件对潜在优势候选表位与HLA-A*0201分子相互作用进行分析。结果:1.免疫组织化学结果显示TEX19在人卵巢癌组织中蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P=0.0061)。2.TEX19蛋白表达水平与SOC患者临床病理参数进行相关性分析,结果表明TEX19的高表达与TNM分期(P=0.008)、淋巴结转移(P=0.014)和浸润深度(P=0.008)具有显著的相关性。3.Kaplan Meier plotter分析结果显示TEX19 m RNA表达水平高的患者总体生存期(Overall survival,OS)和无病生存期(Progression-free survival,PFS)较短(P<0.05)。4.Western blotting、q RT-PCR和免疫荧光实验发现TEX19蛋白和m RNA在浆液性卵巢癌细胞系OVCAR-3、A2780和HO-8910中蛋白表达上调(P<0.05)。5.CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验证明TEX19的敲低显著抑制了OVCAR-3和A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05);6.利用IEDB数据库和pepsite2在线分析工具筛选得到的四条来自TEX19氨基酸序列的候选表位肽。7.通过T2亲和力实验及MOE分子对接模拟分析结果表明四条来自TEX19氨基酸序列的候选表位肽中TL(TLAAAPEGL)能与HLA-A*0201分子结合,且预测结果显示TL与HLA-A*0201分子具有较紧密的相互作用。结论:1.TEX19在卵巢癌中存在明显上调,可能在SOC的增殖、侵袭和转移中发挥关键作用并可能指示SOC患者的不良预后。2.取自TEX19氨基酸序列的TL与HLA-A*0201分子有较强的亲和力,可能是抗SOC治疗性表位肽疫苗的候选优势表位肽。