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稻瘟病是水稻最主要三大病害之一,危害世界各地。传统防治稻瘟病的方法有化学农药防治和抗病品种的选育。但是由于化学农药的滥用造成严重的环境污染,并且可以在动植物体内累积,对人畜等造成危害。而抗病品种的单一性造成其不能够很好的防治水稻稻瘟病。目前,随着生物农药的开发和应用以及陆生资源的有限,更多的人选择从海洋中筛选能够防止植物病害的微生物资源,用来开发新型的生物农药。本实验从辽宁大连湾地区采集样品,通过牛津杯法平板对峙法筛选得到221株菌。其中,细菌179株,真菌24株,放线菌18株。以稻瘟病菌为指示菌株,通过平板对峙法进行初筛和复筛,获得5株具有抑制作用的菌株,其中一株抑制稻瘟病效果很好,通过形态学观察、生理生化鉴定和16s rDNA鉴定为一株海洋枯草芽孢杆菌,命名为DL-006。通过对筛选的DL-006进行碳源、氮源、无机盐等单因素及发酵时间、发酵温度、培养基初始pH值、摇床转速及接种量等条件进行发酵优化。结果得出在本实验中其培养基最佳碳源是蔗糖,最佳氮源是胰蛋白胨,最佳无机盐选择是NaCl。发酵优化的单因素实验得出,发酵时间为72小时、发酵温度为30℃、培养基初始pH为7、接种量为8%、摇床转速为180rpm。最后通过对烟草黑胫病菌(Phytophthora nicotianae)、玉米大斑病菌(Exerohilumturcicum)、禾谷病菌(Fusarium graminearum Schw.)和水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzae)多种植物病原菌及人病原真菌白念球菌(Candidia albicans)的抑菌测试结果得出DL-006能够广谱抗病原菌。应用光学显微镜和电子显微镜对DL-006抑制稻瘟病菌进行显微观察。结果显示未抑制的稻瘟病菌菌丝生长粗细均匀,没有突出,受到抑制后菌丝突出膨大,严重畸形。这一结果展示出DL-006对水稻稻瘟病的抑菌机制。目前,国内外对从海洋中筛选抗水稻稻瘟病的微生物研究尚浅,很多方法并不十分成熟,本文采用常规硫酸铵分级盐析和等电点沉淀法,获得具有抑菌活性的蛋白类物质,说明菌株DL-006能够产生具有抑菌作用的胞外蛋白类活性物质,根据这一结论对DL-006发酵上清液真空冷冻干燥后进行Tricine SDS-PAGE和质谱分析,结果可以看出其发酵液里含有多种蛋白酶类物质。对具有抑菌活性蛋白的提取与鉴定则需要进一步研究。