小鼠听觉剥夺与听觉中枢可塑性的实验研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aierlansi
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神经活动的改变能够诱导成熟哺乳动物的中枢神经系统发生相应的改变。这种被称为“活动依赖可塑性”的改变包括氨基酸类神经递质和受体,它们反过来会重塑神经的反应和信息的处理。由于听觉神经的活动水平易于调控,所以听觉中枢是一个绝佳的研究“活动依赖可塑性”的模型。听觉中枢的可塑性是近年来耳科领域的研究热点之一。早期的听觉剥夺导致了听觉中枢在形态和功能上都发生了相应的改变。研究这些变化,有助于我们深化对听觉中枢功能的认识。其中,听觉剥夺导致的听觉中枢神经核团的神经元凋亡是研究的重点之一,由其所导致的相关的功能改变与临床实践密切相关。所以,在本实验中,我们建立了一个听觉剥夺小鼠的动物模型,并采用不同的手段研究听觉中枢神经核团中神经元的凋亡情况,以期进一步了解后天性聋对听觉中枢的影响。目的:研究听觉剥夺导致的听觉中枢相关神经核团中神经元的凋亡情况。材料和方法:1)选择健康成年雄性BALB/c小鼠100只。术前经ABR测试听力,听阈为SPL40dB者为听力正常。随机分为两组,一组为实验组,另一组为对照组。实验组小鼠在解剖显微镜下,用显微手术器械切除鼓室后壁辨清耳蜗位置后,损毁耳蜗。术后行ABR测试评估听力。动物饲养4个月。2)在细胞凋亡的早期,位于细胞膜内层的磷脂酰丝氨酸暴露于细胞膜表面。这种改变能被Annexin V检测到。放射性同位素标记的Annexin V活体显像是检测细胞凋亡的一种方法。经小鼠尾静脉注射99Tcm-Annexin V 3小时后,进行活体核素显像。3)采用脑干连续切片行HE并记数、NESSIL染色,研究蜗神经核凋亡情况。结果:1)建立了稳定可靠的听觉剥夺小鼠模型。2)术后4个月进行核素显像,实验组有40%的小鼠99Tcm-Annexin V活体细胞凋亡显像呈阳性改变,但体内分布实验两组间未见显著性差异。3)术后4月实验组蜗核神经元数量较对照组明显减少,且表现出凋亡的特征性改变。结论1)耳蜗切除术是建立听觉剥夺动物模型的可靠方法。2)99Tcm-Annexin V活体凋亡细胞显像可能成为一种研究听觉中枢可塑性的新方法,应对其进行进一步研究。3)听觉剥夺导致了成熟动物的蜗神经核神经元凋亡。凋亡在术后较长时间内持续存在。
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