目的:研究Survivin对Eca-109细胞自噬溶酶体形成相关蛋白的调控。方法:选用雷帕霉素(RAPA)构建自噬诱导模型,使用Survivin(SVV)过表达质粒、SVVshRNA质粒、Survivin的抑制剂YM155等对自噬模型进行干预。本实验中选用激光共聚显微镜,观察自噬体及自噬进展变化;选用Western blot法检测自噬溶酶体形成过程相关基因蛋白水平上的表达变化;选用免疫荧光染色法检测溶酶体pH值及细胞中Cathepsin-D的分布特点。结果:1)通过RAPA诱导转染了mRFP-eGFP-LC3质粒的Eca-109细胞后,激光共聚焦显微镜可观察该细胞中绿色荧光明显增多(P<0.05),即自噬体增多;Western blot检测结果显示,LC-I、LC-II的蛋白表达量呈现升高的趋势,LC-I/LC-II的比值减少,p62表达量下降,自噬增强;2)在Eca-109细胞自噬模型中,SVV过表达后,Rab7、LC3蛋白表达量增加(P<0.05),ATG5蛋白表达量下降、ATG16L1蛋白表达量变化不明显。当SVVshRNA及YM155干预后,Rab7蛋白表达量增加,ATG5、ATG16L1(P<0.05)蛋白表达量下降,p62表达量下降;3)SVV过表达后细胞中Cathepsin-D胞浆外逸,分布呈弥散状。结论:选用雷帕霉素对细胞进行诱导构建了自噬模型;RAPA诱导Rab7、ATG5、ATG16L1表达增高,而ATG5、ATG16L1表达增高依赖于SVV的存在;SVV与RAPA诱导的肿瘤细胞自噬过程是一种特定时段和明确的靶基因的伴随调控关系,它参与了自噬过程的前期自噬体形成及后期自噬溶酶体功能实施阶段。ATG5/ATG16L1和p62是SVV在自噬形成过程中的调控位点,在自噬体形成初期,SVV通过控制ATG5/ATG16L1基因的表达促进早期自噬体的形成,促进自噬体的起始过程,同时抑制了自噬体的降解;SVV在肿瘤中特异性的高表达会干预溶酶体的功能,主要表现在影响溶酶体酸性环境和溶酶体膜通透性两个方面。